2結(jié)果與分析
2.1革蘭氏陰性菌的抑制結(jié)果
抑菌圈大小可反映抑菌保護劑抑菌能力,抑菌圈越大,抑菌能力越強(表1)。當不同濃度桑黃水提物作用下,混有有害微生物的平板出現(xiàn)抑菌圈,且抑菌圈隨樣品作用濃度的升高,直徑也不斷擴大;桑黃水提物對志賀氏菌抑制作用較弱,對于大腸桿菌的抑制較為明顯,在1 mg/mL作用濃度下,即對大腸桿菌的生長具有抑制作用。由此可得出結(jié)論,桑黃水提物能有效抑制革蘭氏陰性菌生長,但對不同細菌抑制程度有所不同。
表1不同濃度桑黃水提物對陰性菌的抑制
2.2革蘭氏陰性菌的抑制結(jié)果
不同濃度桑黃水提物作用下,混有有害微生物金黃色葡萄球菌、李斯特菌、藤黃微球菌以及枯草芽孢桿菌的平板均可以觀察到抑菌圈。抑菌作用具有樣品濃度依賴性,隨樣品濃度的升高,抑制作用加強。樣品在低濃度范圍對藤黃微球菌作用不明顯;相對樣品對金黃色葡萄球菌和枯草芽孢桿菌抑制作用較為顯著。
表2不同濃度桑黃水提物對陽性菌的抑制
2.3霉菌生長抑制情況
將不同濃度桑黃水提物混入PDA固體培養(yǎng)基,將白霉、青霉菌落置于平板中心,對霉菌生長的抑制作用與霉菌生長圈直徑大小呈負相關(guān)(表3)。樣品作用下,霉菌生長圈直徑相對于空白對照縮小,且霉菌生長圈直徑隨著作用劑濃度增大而縮小。10 mg/mL作用濃度下,生長圈直徑分別為空白對照直徑的16.2%、40.6%,因而樣品可有效抑制霉菌的生長。
2.4酵母生長抑制情況
酵母等微生物在培養(yǎng)液中繁殖都能產(chǎn)生濁度。利用Bioscreen全自動生長曲線分析儀測定酵母生長過程中吸光值的改變,反映其生長速度及菌體濃度等。從圖1可以看出,在桑黃水提物的作用下,對酵母的生長出現(xiàn)了抑制作用,且隨作用濃度的升高,最大吸光值越小,酵母生長周期最高菌體濃度越低。
表3不同濃度桑黃水提物對霉菌生長的抑制作用
2.5巴殺保鮮乳中菌群生長抑制情況
隨著桑黃水提物濃度的提高,保存相同時間的保鮮牛奶乳中菌群總數(shù)越低,10 mg/mL作用濃度下,10℃保存14 d的巴殺鮮乳菌群總數(shù)最高未超過2×104cfu/mL。可見,桑黃水提物能有效控制保鮮牛奶乳中菌群總數(shù),起到延長貨架期的作用。
圖1不同濃度桑黃水提物對酵母生長的抑制作用
圖2不同濃度桑黃水提物對細菌生長的抑制作用
2.6有益菌生長作用情況
選取乳制品中常見有益菌進行試驗,保加利亞乳桿菌、嗜熱鏈球菌并沒有產(chǎn)生可見的抑菌圈,只有在濃度較高時才在雙歧桿菌平板上觀察到較小的抑菌圈(表4),所以本發(fā)明的抑菌保護劑對有益菌無顯著抑制作用。
表4桑黃水提物對有益菌的作用
3結(jié)論與討論
由于不同乳制品中成分較為復(fù)雜,添加菌種類別、奶源成分比例、加工方式、生產(chǎn)設(shè)備等均存在差異,因此很難用統(tǒng)一的抑菌方法應(yīng)用到乳品企業(yè)生產(chǎn)中。目前多數(shù)乳品企業(yè)通過改變生產(chǎn)工藝、提高原奶的品質(zhì)來達到延長貨架期的目的,現(xiàn)有澳大利亞乳企將巴氏殺菌乳從原有21 d保質(zhì)期,通過生產(chǎn)工藝改造將貨架期延長至45 d。另有乳企通過添加天然、安全的抑菌成分的方式,延長保鮮乳制品的貨架期,但目前食品標準允許添加的抑菌成分較少,且不具有廣譜抑菌性。應(yīng)當尋求多種保鮮技術(shù)的協(xié)同作用的方式,以達到抑制乳制品中有害微生物生長的目的。
本試驗以食藥用真菌桑黃(Phellinus baumii.)子實體為研究對象,使用沸水提取的方法,提取子實體中具有抑菌性的物質(zhì)。研究分析了該水提物抑菌特性,分別選取了乳制品中具有代表性常見的幾類微生物進行抑菌試驗。桑黃子實體水提物對革蘭氏陰性菌、革蘭氏陽性菌、霉菌以及酵母均有不同程度的抑制作用。對大腸桿菌等革蘭氏陰性菌,在1 mg/mL作用濃度時表現(xiàn)出了抑菌性質(zhì),但對志賀氏菌作用不明顯;對于金黃色葡萄球菌等陽性菌,抑制效果較佳,在較低濃度0.5 mg/mL作用濃度下,即對部分陽性菌表現(xiàn)抑菌活性。酵母、霉菌是乳制品生產(chǎn)、運輸、存放方程中,常見微生物污染源,本研究中考察了在桑黃水提物不同作用濃度下,有效抑制了酵母和霉菌的生長,一定程度上延長了保鮮牛乳的貨架期。另外,本研究發(fā)現(xiàn),桑黃水提物對牛乳中有益菌的影響除在50 mg/mL高濃度作用下,對雙歧桿菌出現(xiàn)輕微抑制現(xiàn)象,但對保加利亞乳桿菌和嗜熱鏈球菌不存在顯著抑制作用。因此,1—10 mg/mL桑黃水提物在不抑制有益菌生長的前提下,實現(xiàn)了對牛乳中有害細菌、真菌有效的抑制,能顯著控制巴殺牛乳中菌群總數(shù)的變化,相對Nisin等抑菌劑具有廣譜抑菌性。
不同濃度的桑黃水提物對乳制品中有害指示菌的生長抑制作用(實驗儀器與方法)
不同濃度的桑黃水提物對乳制品中有害指示菌的生長抑制作用(實驗結(jié)果與結(jié)論)