細(xì)菌生長曲線一般測幾個小時
具體看菌種,不同菌種生長周期是不一樣的,有一些菌種培養(yǎng)從對數(shù)期到衰亡期也只有十來個小時,有一些菌種的培養(yǎng)就得連夜測的,測量時間范圍為24小時左右。另外要根據(jù)研究的目的來設(shè)定條件,所用的條件或多或少的會影響曲線。
細(xì)菌生長曲線多久測一次?
比色皿監(jiān)測,通常需要每隔一定時間(如1小時),測定微生物的生長狀況。每次檢測需要大約1.5ml微生物懸液,并且檢測之前需要一定時間進(jìn)行樣品抽取。
微孔板則主要用于長時間連續(xù)監(jiān)測微生物生長狀況。檢測過程中,每孔只需200微升懸液,設(shè)定相應(yīng)檢測間隔時間,儀器便可自動實時監(jiān)測微生物生長狀況。因為通常所用的微孔板為96孔板,所以這種檢測方法非常適合于不同培養(yǎng)基條件或者不同菌株的多樣品重復(fù)長時間自動監(jiān)測。
細(xì)菌的生長曲線圖
細(xì)菌生長規(guī)律
細(xì)菌生長速度很快,一般細(xì)菌約20分鐘分裂一次。若按此速度計算,一個細(xì)胞經(jīng)7小時可繁殖到約200萬個,10小時后可達(dá)10億個以上,隨著時間的延長細(xì)菌群體將會龐大到難以想象的程度。
但事實上并非如此,由于細(xì)菌繁殖中營養(yǎng)物質(zhì)的逐漸耗竭,有害代謝產(chǎn)物的逐漸積累,細(xì)菌不可能始終保持高速度的無限繁殖。經(jīng)過一段時間后,細(xì)菌繁殖速度漸減,死亡菌數(shù)增多,活菌增長率隨之下降并趨于停滯。
將一定數(shù)量的細(xì)菌接種于適宜的液體培養(yǎng)基中,連續(xù)定時取樣檢查活菌數(shù),可發(fā)現(xiàn)其生長過程的規(guī)律性。以培養(yǎng)時間為橫坐標(biāo),培養(yǎng)物中活菌數(shù)的對數(shù)為縱坐標(biāo),可繪制出一條生長曲線(growth curve)。
根據(jù)生長曲線,細(xì)菌的群體生長繁殖可分為四期:
1.遲緩期(lag phase)
細(xì)菌進(jìn)入新環(huán)境后的短暫適應(yīng)階段。該期菌體增大,代謝活躍,為細(xì)菌的分裂繁殖合成并積累充足的酶、輔酶和中間代謝產(chǎn)物;但分裂遲緩,繁殖極少。遲緩期長短不一,按菌種、接種菌的菌齡和菌量,以及營養(yǎng)物等不同而異,一般為1~4小時。
2.對數(shù)期(logarithmic phase)
又稱指數(shù)期(exponential phase)。細(xì)菌在該期生長迅速,菌數(shù)以恒定的幾何級數(shù)增長,生長曲線圖上細(xì)菌數(shù)的對數(shù)呈直線上升,達(dá)到頂峰狀態(tài)。此期細(xì)菌的形態(tài)、染色性、生理活性等都較典型,對外界環(huán)境因素的作用敏感。因此,研究細(xì)菌的生物學(xué)性狀(形態(tài)染色、生化反應(yīng)、藥物敏感試驗等)應(yīng)選用該期的細(xì)菌。一般細(xì)菌對數(shù)期在培養(yǎng)后的8~18小時。
3.穩(wěn)定期(stationary phase)
由于培養(yǎng)基中營養(yǎng)物質(zhì)消耗,有害代謝產(chǎn)物積聚,該期細(xì)菌繁殖速度漸減,死亡數(shù)逐漸增加,兩者大致平衡,因此該期的活菌數(shù)大致恒定,總的細(xì)菌數(shù)緩慢增加,細(xì)菌形態(tài)、染色性和生理性狀常有改變。一些細(xì)菌的芽胞、外毒素和抗生素等代謝產(chǎn)物大多在穩(wěn)定期產(chǎn)生。
4.衰亡期(decline phase)
穩(wěn)定期后細(xì)菌繁殖越來越慢,死亡數(shù)越來越多,并超過活菌數(shù)。
該期細(xì)菌形態(tài)顯著改變,出現(xiàn)衰退型或菌體自溶難以辨認(rèn);生理代謝活動也趨于停滯。因此,陳舊培養(yǎng)的細(xì)菌難以鑒定。
細(xì)菌生長曲線只有在體外人工培養(yǎng)的條件下才能觀察到。在自然界或人類、動物體內(nèi)繁殖時,受多種環(huán)境因素和機(jī)體免疫因素的多方面影響,不可能出現(xiàn)在培養(yǎng)基中的那種典型的生長曲線。
細(xì)菌的生長曲線在研究工作和生產(chǎn)實踐中都有指導(dǎo)意義。掌握細(xì)菌生長規(guī)律,可以人為地改變培養(yǎng)條件,調(diào)整細(xì)菌的生長繁殖階段,更為有效地利用對人類有益的細(xì)菌。例如在培養(yǎng)過程中,不斷地更新培養(yǎng)液和對需氧菌進(jìn)行通氣,使細(xì)菌長時間地處于生長旺盛的對數(shù)期,這種培養(yǎng)稱為連續(xù)培養(yǎng)。
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