2.4 LJK8菌株的初步鑒定
觀察LJK8菌株的平板培養(yǎng)情況,(見圖3),菌落為乳白色但不透明,圓形,邊緣整齊。菌株經(jīng)革蘭氏染色后于顯微鏡下觀察(見圖4),細(xì)胞完全是細(xì)桿狀,均為紫色,因此屬于革蘭氏陽性菌且無芽孢。
圖3 LJK8菌株的菌落形態(tài)
圖4 LJK8菌株的革蘭氏染色圖
2.5 LJK8菌株的生理生化試驗
經(jīng)過一系列的生理生化試驗,觀察結(jié)果,見表1。
表1生理生化試驗結(jié)果
2.6 LJK8菌株的16S rDNA測定結(jié)果
將LJK8菌株的16S rDNA序列提交到GenBank數(shù)據(jù)庫并構(gòu)建菌株的系統(tǒng)發(fā)育樹,見圖5??梢猿醪借b定LJK8菌株屬于Rheinheimeraaquatica(水萊茵海默氏菌),擴增的16S rDNA與Rheinheimeraaquatica序列相似性達(dá)到99.99%,序列同源性為98%,所以初步確定該菌株為Rheinheimeraaquatica。
LJK8菌株的16S rDNA序列:
CGTAGGAAGCTACCCGATAGAGGGGGATACCAGTTGGAAACGACTGTTAATACCGCATAATGTCTACGGACCAAAGTGTGGGACCTTCGGGCCACATGCTATCGGATGCGCCTACGTGGGATTAGCTAGTTGGTGAGGTAATGGCTCACCAAGGCAACGATCCCTAGCTGGTTTGAGAGGATGATCAGCCACACTGGAACTGAGACACGGTCCAGACTCCTACGGGAGGCAGCAGTGGGGAATATTGGACAATGGGCGCAAGCCTGATCCAGCCATGCCGCGTGTGTGAAGAAGGCCTTCGGGTTGTAAAGCACTTTCAGTTGGGAGGAAGGGTTGTGTGTTAATAGTACACAGCCTTGACGTTACCAACAGAAGAAGCACCGGCTAACTCTGTGCCAGCAGCCGCGGTAATACAGAGGGTGCAAGCGTTAATCGGAATTACTGGGCGAAGCGCACGTAGGCGGTTTTTTAAGTCAGATGTGAAAGCCCCGGGCTCAACCTGGGAATTGCATTTGAAACTGGAAAACTAGAGTGTGTGAGAGGGGGGTAGAATTCCAAGTGTAGCGGTGAAATGCGTAGAGATTTGGAGGAATACCAGTGGCGAAGGCGGCCCCCTGGCACAACACTGACGCTCAGGTGCGAAAGCGTGGGGAGCAAACAGGATTAGATACCCTGGTAGTCCACGCCGTAAACGATGTCTACTAGCTGTTCGTGACCTTGTGTCGTGAGTAGCGCAGCTAACGCACTAAGTAGACCGCCTGGGGAGTACGGTCGCAAGATTAAAACTCAAATGAATTGACGGGGGCCCGCACAAGCGGTGGAGCATGTGGTTTAATTCGACGCAACGCGAAGAACCTTACCTACTCTTGACATCCAGAGAAGACTGCAGAGATGCGGTTGTGCCTTCGGGAACTCTGAGACAGGTGCTGCATGGCTGTCGTCAGCTCGTGTTGTGAAATGTTGGGTTAAGTCCCGCAACGAGCGCAACCCTTATCCTTAGTTGCCAGCGCGTAATGGCGGGAACTCTAGGGAGACTGCCGGTGATAAACCGGAGGAAGGTGGGGACGACGTCAAGTCATCATGGCCCTTACGAGTAGGGCTACACACGTGCTACAATGGTATGTACAGAGGGAGGCAAGCTGGCGACAGTGAGCGGATCTCTTAAAGCATATCGTAGTCCGGATCGCAGTCTGCAACTCGACTGCGTGAAGTCGGAATCGCTAGTAATCGCAAATCAGAATGTTGCGGTGAATACGTTCCCGGGCCTTGTACACACCGCCCGTCACACCATGGGAGTGGGTTGCAAAAGAAGTAGGTAGCTTAACCTTCGGGAGGGCGCTTACCACTTTGTGATTCATGACTGGGGTGAAGTCGTAA。
圖5 LJK8的16S rDNA序列比對結(jié)果
3討論
從鹽含量高的泡菜為原料,以硫酸銨為唯一氮源的篩選培養(yǎng)基,篩選出具有氨氮降解能力的微生物,再進(jìn)行分離和純化,篩選出1株對高氨氮含量水相具有較高降解效率的菌株LJK8。經(jīng)過測定,LJK8的最大波長及生長曲線、革蘭氏染色及對其進(jìn)行的一系列生理生化試驗,可以初步了解LJK8菌株的基本屬性。LJK8菌株的最適吸收波長在380 nm處,由其生長曲線可以看出,LJK8菌株在培養(yǎng)14 h時達(dá)到最大生長量;當(dāng)以氨氮初始含量為500 mg/L的培養(yǎng)基培養(yǎng)時,并測定其氨氮降解率,在24~72 h內(nèi)的降解效率達(dá)到64.85%,通過對LJK8菌株生長量及氨氮含量變化的檢測,表明菌株生長與降解氨氮是同步進(jìn)行的,說明其可在較長時間內(nèi)發(fā)揮降解作用。
目前對能處理水體或者土壤中氨氮的文獻(xiàn)報道還比較少,而我們研究從泡菜中篩選出來的高效氨氮降解菌LJK8菌株屬于Rheinheimeraaquatica(水萊茵海默氏菌),還未見該菌用于氨氮降解的報道,LJK8如果應(yīng)用于水體污染的處理方面還有很大的發(fā)展?jié)摿?,因此可對其在養(yǎng)殖污水、工業(yè)污水或者土壤中氨氮的深度凈化處理上的應(yīng)用再進(jìn)一步進(jìn)行研究。不過篩選出來的LJK8菌株相對于同一時段篩選的其他菌株的氨氮降解效率雖然較高,但是在如此高濃度的氨氮條件下仍然還有相當(dāng)量的氨氮殘留,因此我們后期將會研究該菌的降解工藝,并對其降解條件進(jìn)行優(yōu)化,增強菌株對高濃度氨氮污水的凈化能力。期望LJK8能在后期的養(yǎng)殖污水及水體污染處理方面發(fā)揮一定的作用。
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