微藻的生長可以用SLogistic曲線進(jìn)行描述,SLogistic曲線又稱S型生長曲線,微生物種群增長、陸生及水生動(dòng)物種群增長、細(xì)胞生長等過程均可用其描述。完整的微生物生長曲線包括漸增期、快增期、緩增期和衰減期4個(gè)時(shí)期。用OriginPro8.0中的SLogistic1模型對(duì)微藻生長數(shù)據(jù)進(jìn)行擬合可以得到擬合度較高的生長曲線,該模型引入最大生長速率以及終止生物量,能準(zhǔn)確、定量地描述生物生長規(guī)律。擬合生長曲線可以呈現(xiàn)出藻種狀態(tài),整體把握藻種活力以及再生長情況。


SLogistic1模型擬合生長曲線


以時(shí)間(天數(shù))為自變量(X)、生物量(OD560nm)為因變量(Y),在Origin Pro 8.0中對(duì)其進(jìn)行SLogistic1(SLogistic模型同系列的近似模型)的生長曲線擬合,得到高擬合度的生長曲線及相應(yīng)函數(shù)。


對(duì)生長曲線函數(shù)進(jìn)行一階求導(dǎo)并繪圖,得到生長速率曲線圖,可求出藻種的最大生長速率(0≤X≤13 d)。對(duì)生長速率進(jìn)行二階求導(dǎo)得到生長速率函數(shù)的兩個(gè)拐點(diǎn),兩拐點(diǎn)對(duì)應(yīng)的時(shí)間點(diǎn)將生長曲線的生長過程分為漸增期、快增期和緩增期3個(gè)階段。在對(duì)應(yīng)的保藏時(shí)間下,統(tǒng)計(jì)組內(nèi)的漸增期、快增期、緩增期、生物積累量、最大生長速率、最大生長速率發(fā)生時(shí)間指標(biāo),并確定可以進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析的特征指標(biāo),以評(píng)價(jià)保藏藻種活力。


擬合生長曲線結(jié)果


SLogistic模型的選擇


SLogistic模型所對(duì)應(yīng)的假設(shè)條件是在有限的生物資源條件下單個(gè)微生物生長具有相同的增長率,且所需營養(yǎng)相同。把增長率dy/dx與任意時(shí)間的種群生物量y(x)聯(lián)系在一起,典型的SLogistic模型可以表示為:

式中:k為常數(shù);a為環(huán)境容納最大生物容量,本試驗(yàn)以吸光度定義,即該生物生長過程中所能達(dá)到的OD560nm峰值。


其模型所包含的內(nèi)在機(jī)制為:(1)隨著y逐漸增長到a過程中,未知利用“剩余空間”(y/a)逐漸減少;(2)種群增長率先由小變大,到曲線中點(diǎn)即生長轉(zhuǎn)折點(diǎn)(a/2)最大,然后逐漸減少,當(dāng)達(dá)到最大生物容量時(shí),增長率趨于零。


SLogistic1模型是SLogistic模型的近似模型,其曲線相比于SLogistic曲線具有更加清晰的3個(gè)生長階段,其快增期更加陡峭??紤]到微藻的生長具有更明顯的快增期,因此SLogistic1曲線更適合描述微藻的生長規(guī)律。SLogistic1模型可以表示為:


其中最大值及發(fā)生時(shí)間為:


SLogistic1曲線的特點(diǎn)是隨X增加,Y值開始增長緩慢,而在以后的某一范圍內(nèi)迅速增長,X達(dá)到某限度后,Y增長趨于緩慢,整個(gè)曲線略呈陡峭的“S”型,兩條漸近線分別為Y=a和Y=0,a值的物理意義是Y所能達(dá)到的最大值,k和XC為Slogistic1曲線方程的特征參數(shù)。采用SLogistic1模型進(jìn)行保藏藻種再生長曲線的擬合,分析可得生長曲線所包含的漸增期、快增期、緩增期以及生長轉(zhuǎn)折點(diǎn)。


以保藏藻株F-1070(編號(hào)1-2-2)保藏兩個(gè)月時(shí)為例,活化再生長后的再生長擬合曲線及生長速率曲線見圖1。

圖1正交試驗(yàn)藻種的再生長擬合曲線及生長速率曲線


由圖1可知,保藏藻株F-1070(編號(hào)1-2-2)保藏兩個(gè)月時(shí)活化再生長后的SLogistic1擬合生長曲線擬合度較好,其中虛線曲線為擬合的生長曲線Y(X)(0≤X≤13 d),實(shí)線曲線為生長速率曲線R(X)(0≤X≤13d),R(X)峰值為最大生長速率。對(duì)R(X)二階求導(dǎo)得到其兩拐點(diǎn)(R1,X1)、(R2,X2),X1、X2將整個(gè)生長曲線周期分為漸增期、快增期和緩增期,函數(shù)模型擬合的曲線具有Y=a的漸近線,因此曲線不包含生物量下降的衰亡期。


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