3討論
近年來(lái)，由奇異變形桿菌引起的食物中毒病例逐漸增加。然而，目前針對(duì)食源性致病菌污染動(dòng)物性食品并沒(méi)有較好的解決方案，傳統(tǒng)的預(yù)防和控制策略無(wú)法滿足當(dāng)前消費(fèi)者需求。因此，尋找綠色、無(wú)污染、環(huán)境友好的防控措施尤為重要。噬菌體作為一種天然的抗菌劑，因其宿主特異性、高效性和安全性已成為食品工業(yè)中一種新的抗菌方法。
在本研究中，從污水中分離一株裂解性噬菌體vB_PMC-PL1，該噬菌體能裂解奇異變形桿菌和普通變形桿菌，但對(duì)大腸桿菌、沙門氏菌、肺炎克雷伯菌和金黃色葡萄球菌不具有裂解活性，這表明噬菌體PL1具有較高的特異性，這種原因可能與噬菌體PL1受體結(jié)合蛋白特異性識(shí)別變形桿菌中特定的表面受體有關(guān)。盡管噬菌體PL1的宿主譜較窄，但可豐富變形桿菌噬菌體資源庫(kù)，通過(guò)與多種噬菌體配伍使用，以達(dá)到擴(kuò)大噬菌體裂解范圍的目的。
一步生長(zhǎng)曲線顯示噬菌體PL1的潛伏期為20 min，與之前報(bào)道的噬菌體RP6和RP7的潛伏期一致。噬菌體PL1的裂解量為106 PFU/cell，高于噬菌體vB_PmiP_pPm05、噬菌體Proteus_virus_309、vB_PmM_XNR和噬菌體Q29，裂解量不同可能與噬菌體特性有關(guān)。此外，噬菌體PL1在pH 3～11范圍內(nèi)保持良好的穩(wěn)定性，相比于噬菌體P2-71（4～11）、噬菌體vB_PmiP_pPm05（4～9）、噬菌體Proteus_virus_309（5～11）、噬菌體vB_PmM_XNR（4～6）和噬菌體Q29（4～11）具有較寬的酸堿范圍，表明噬菌體PL1在未來(lái)的制備、運(yùn)輸和應(yīng)用過(guò)程中能夠適應(yīng)各種環(huán)境變化，并保持較高的裂解效率。噬菌體作為生物防治劑用于食品工業(yè)的前提之一不能攜帶和傳遞有害基因。通過(guò)全基因分析可知，噬菌體PL1不含有任何毒力基因、抗生素抗性基因和整合酶相關(guān)基因，表明噬菌體PL1具有較好的生物安全性，可以用于食品工業(yè)中。
食品生產(chǎn)加工的衛(wèi)生條件是保障人類健康的重要因素，食源性致病菌通常會(huì)在食品加工用具和食物接觸的物體表面（如不銹鋼、塑料、玻璃等）形成生物被膜，使得不易清除，從而導(dǎo)致食源性致病菌的交叉污染，對(duì)食品加工業(yè)構(gòu)成了重大的安全威脅。目前，關(guān)于使用噬菌體清除食品接觸材料中的生物被膜的報(bào)道越來(lái)越多。Jaroni等已經(jīng)證實(shí)，噬菌體可以有效減少食物接觸表面的產(chǎn)志賀毒素大腸桿菌的生物被膜；Byun等利用噬菌體混合物有效根除食品接觸材料上的生物被膜，為噬菌體的應(yīng)用提供了良好的理論參考。本研究評(píng)估噬菌體PL1對(duì)不銹鋼和高密度聚乙烯上奇異變形桿菌生物被膜的清除能力。結(jié)果表明，噬菌體PL1可以顯著清除不銹鋼和高密度聚乙烯表面生物被膜和減少生物被膜中活菌的數(shù)量。因此噬菌體PL1可作為防控食品加工中細(xì)菌生物被膜污染的一種方式。
根據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道，在生雞肉中檢測(cè)出具有強(qiáng)生物被膜形成能力的奇異變形桿菌，該菌易附著生雞肉中，具有傳播和流行風(fēng)險(xiǎn)，對(duì)人類健康構(gòu)成威脅。因此，本研究評(píng)估了噬菌體PL1在不同溫度和不同MOI條件下去除人工污染的雞胸肉中細(xì)菌能力。在4℃冷藏條件下，噬菌體PL1可有效抑制雞胸肉細(xì)菌增長(zhǎng)。而在25℃培養(yǎng)6 h后，細(xì)菌數(shù)量開(kāi)始增多。出現(xiàn)這種情況的原因可能是低溫環(huán)境下細(xì)菌生長(zhǎng)受到影響，加之噬菌體PL1侵染并裂解細(xì)菌，二者共同降低細(xì)菌數(shù)量，抑制細(xì)菌生長(zhǎng)。無(wú)論在4℃還是25℃條件下，相同時(shí)間內(nèi)經(jīng)噬菌體PL1處理后，雞胸肉中細(xì)菌含量均低于對(duì)照組。因此，在低溫環(huán)境下噬菌體PL1處理后可更好的減少食品污染的風(fēng)險(xiǎn)，在食品防控領(lǐng)域具有應(yīng)用前景。
4結(jié)論
噬菌體PL1作為一株新的奇異變形桿菌噬菌體，潛伏期短、裂解量大、安全性高，具有廣泛的pH值穩(wěn)定性和良好的溫度穩(wěn)定性。噬菌體PL1能裂解奇異變形桿菌和普通變形桿菌，還能抑制和清除不同材料上的細(xì)菌生物被膜，在不同溫度條件下抑制雞胸肉中細(xì)菌的生長(zhǎng)。因此，噬菌體PL1具有作為食品工業(yè)中生物防治劑的潛力。
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