高級(jí)醇由于其刺激性和強(qiáng)烈的風(fēng)味而顯著影響其酒精感官特性。這些化合物表現(xiàn)出不同的風(fēng)味特征。不同的比例，與其他風(fēng)味物質(zhì)共存這些化合物的含量都需要獲得不同香型白酒中國(guó)。適當(dāng)?shù)暮亢捅壤母呒?jí)醇，中國(guó)白酒醇香可口。相反，過量的高級(jí)醇會(huì)導(dǎo)致強(qiáng)烈的雜醇油風(fēng)味，并可能損害人體健康，導(dǎo)致腦癱和其他癥狀。高級(jí)醇是合成乙酸酯的基礎(chǔ)，這是中國(guó)白酒中另一類重要的揮發(fā)性風(fēng)味物質(zhì)。
在這項(xiàng)研究中，研究人員分別構(gòu)建了具有ILV1，LEU1和LEU2缺失的α型和a型單倍體釀酒酵母突變體。通過將α型和a型單倍體突變體雜交來構(gòu)建基因雙等位基因缺失二倍體突變體。此外，成功構(gòu)建了帶有ILV1，LEU1和LEU2單等位基因缺失的工程二倍體菌株。基因工程對(duì)α型單倍體a的影響在模擬酒精發(fā)酵過程中研究了風(fēng)味化合物上的單型單倍體和二倍體菌株。我們的結(jié)果表明，不同的基因工程策略以不同的方式影響與高級(jí)酒精相關(guān)的代謝。此外，本研究試圖解釋基因工程策略對(duì)合成和代謝途徑的影響。該研究可為白酒及其他酒精飲料的代謝研究和酵母菌株的未來優(yōu)化提供有價(jià)值的參考。
Bioscreen全自動(dòng)生長(zhǎng)曲線分析儀的應(yīng)用：
將不同類型的酵母菌株和培養(yǎng)基轉(zhuǎn)移到Bioscreen生長(zhǎng)曲線分析儀的蜂窩板中，使用Bioscreen自動(dòng)生長(zhǎng)曲線分析系統(tǒng)于30°C下每1小時(shí)測(cè)定一次光密度（OD 600)，獲得不同基因編輯后的酵母菌株的生長(zhǎng)曲線。
圖1、重組菌株及其親本菌株的生長(zhǎng)曲線。a)基因缺失α型單倍體重組體和α5的生長(zhǎng)曲線。b)基因缺失a型單倍體重組體和a8的生長(zhǎng)曲線。c)雙等位基因缺失二倍體重組體和AY15的生長(zhǎng)曲線。d)單等位基因缺失二倍體重組體和AY15的生長(zhǎng)曲線。通過使用Bioscreen全自動(dòng)生長(zhǎng)曲線分析儀以每1.5小時(shí)測(cè)量培養(yǎng)物的光密度（OD）600在30°C監(jiān)測(cè)重組菌株及其親本菌株生長(zhǎng)曲線。
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