細(xì)菌在生長(zhǎng)繁殖過(guò)程中，可通過(guò)測(cè)定細(xì)菌的生長(zhǎng)量，來(lái)了解細(xì)菌的各種生理生化狀態(tài)。目前，細(xì)菌生長(zhǎng)量的測(cè)定主要有４類(lèi)方法：細(xì)胞數(shù)目的測(cè)量（直接顯微計(jì)數(shù)法、平板活菌技術(shù)、載片培養(yǎng)技術(shù)、微孔過(guò)濾法、庫(kù)爾特計(jì)數(shù)器、流動(dòng)細(xì)胞光度法、表熒光濾過(guò)技術(shù)、熒光抗體技術(shù)、微型ＥＬＩＳＡ、電子顯微鏡）；細(xì)胞量的測(cè)量（干重法、比濁法、離心壓縮細(xì)胞體積法）；細(xì)菌濃度的間接測(cè)量（通過(guò)測(cè)定核酸、蛋白質(zhì)、多糖、脂質(zhì)、ＡＴＰ等含量來(lái)估算菌濃度，或通過(guò)測(cè)量Ｃ、Ｎ、Ｏ和Ｐ等元素的含量間接計(jì)算菌濃度）；生物量在線檢測(cè)（微熱量計(jì)法、熒光法、電容／電導(dǎo)／阻抗法等）［１］。其中比濁法檢測(cè)成本低、快速，而在線檢測(cè)技術(shù)準(zhǔn)確，可實(shí)時(shí)分析細(xì)菌生長(zhǎng)過(guò)程中的生長(zhǎng)量，因此具有較好的應(yīng)用前景。該文以早期分離篩選的泰樂(lè)菌素降解菌——無(wú)丙二酸檸檬酸桿菌（Ｃｉｔｒｏｂａｃｔｅｒａｍａｌｏｎａｔｉｃｕｓ）為材料［２］，比較了活菌稀釋計(jì)數(shù)法、比濁法和電導(dǎo)率法繪制該菌生長(zhǎng)曲線的差異，為研究該菌的形態(tài)學(xué)特征、適應(yīng)性及泰樂(lè)菌素降解機(jī)理提供其生長(zhǎng)量參數(shù)。
生長(zhǎng)曲線的測(cè)定?。矗福枧囵B(yǎng)后的泰樂(lè)菌素降解菌種子液，將種子液按１０％的接種量培養(yǎng)，分別在８～７２ｈ中，間隔８ｈ取樣。用活菌計(jì)數(shù)法測(cè)量培養(yǎng)基中細(xì)菌濃度，同時(shí)以１２１℃，滅菌２０ｍｉｎ的ＹＰＤ培養(yǎng)基為對(duì)照，采用比濁法測(cè)定菌液濃度，重復(fù)３次，計(jì)算平均值；分別在８～７２ｈ間，每間隔４ｈ取菌液１ｍＬ，加入裝有３０ｍＬ去離子水的試管中，同上條件超聲處理，取細(xì)胞破碎后的菌液５．０ｍＬ，用ＤＤ－１２Ａ型電導(dǎo)率儀測(cè)定電導(dǎo)率值，每個(gè)樣品測(cè)定３次，計(jì)算平均值。繪制泰樂(lè)菌素降解菌培養(yǎng)時(shí)間與Ｉｎ（ｃｆｕ／ｍＬ）以及ＯＤ５００ｎｍ和電導(dǎo)率值的生長(zhǎng)曲線。
泰樂(lè)菌素降解菌的生長(zhǎng)曲線
分別采用活菌稀釋計(jì)數(shù)法、電導(dǎo)率法和比濁法對(duì)泰樂(lè)菌素降解菌的生長(zhǎng)曲線進(jìn)行測(cè)定，結(jié)果如圖１，圖２所示。活菌稀釋計(jì)數(shù)法測(cè)定的降解菌生長(zhǎng)曲線符合細(xì)菌生長(zhǎng)的各個(gè)階段：０～８ｈ為降解菌生長(zhǎng)的延遲期，８～２４ｈ為對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期，２４～５６ｈ為穩(wěn)定期，５６～７２ｈ為衰亡期。電導(dǎo)率法測(cè)定的生長(zhǎng)曲線也有明顯的延遲期、對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期和穩(wěn)定期，且延遲期和對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的時(shí)間范圍和活菌稀釋計(jì)數(shù)法相似，但此法所測(cè)到的穩(wěn)定期為２４～７２ｈ，無(wú)衰亡期。而分光光度法的生長(zhǎng)曲線始終保持上升狀態(tài)，無(wú)明顯的延遲期、對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期、穩(wěn)定期和衰亡期。
相關(guān)新聞推薦
1、作物細(xì)菌性、真菌性等各類(lèi)病害的主要特征及區(qū)分方法
2、原始菌株、持留菌及抗藥菌株藥敏特性和生長(zhǎng)優(yōu)勢(shì)比較（一）
3、生物質(zhì)發(fā)酵制氫過(guò)程基礎(chǔ)研究