為研究硫色曲霉的生長條件和產(chǎn)毒情況,本研究分別在不同固體培養(yǎng)基、天然培養(yǎng)基中培養(yǎng)硫色曲霉,觀察其菌落形態(tài)、生長速率和產(chǎn)毒條件。


結(jié)果表明,硫色曲霉在YES培養(yǎng)基上生長最好,菌絲發(fā)達,在PDA培養(yǎng)基上生長僅次于YES培養(yǎng)基,可能是因為YES培養(yǎng)基上的酵母浸膏營養(yǎng)豐富,含有多種有利于微生物分泌代謝產(chǎn)物的因子,如多肽、氨基酸、碳源、氮源和微量元素等,同時有蔗糖作為碳源,從而使硫色曲霉生長較好;而PDA培養(yǎng)基中雖然碳源充足,但氮源與無機鹽較少,故長勢相對較弱,但兩者均可為菌體提供充足的營養(yǎng)成分,用來觀察硫色曲霉的生長特性。


前期研究表明,硫色曲霉在YES培養(yǎng)基上生長最好,因此選擇YES培養(yǎng)基培養(yǎng)硫色曲霉并改變培養(yǎng)基中的pH值,結(jié)果發(fā)現(xiàn)不同pH中的硫色曲霉生長差異較大,在pH值為8時,硫色曲霉有最大的生長直徑,這可能是因為環(huán)境中不同的pH值會影響到細胞膜所帶的電荷,從而導致細胞對營養(yǎng)物質(zhì)的吸收也出現(xiàn)差異性。研究了pH對微生物生長的抑制作用,發(fā)現(xiàn)pH為中性和弱堿性時,微生物的生長速率較高。這與本研究中硫色曲霉在弱堿性條件下有最大生長直徑,而在酸性和堿性條件下,其菌落直徑會減小的結(jié)果也較為一致。固體培養(yǎng)基中,硫色曲霉在PDA培養(yǎng)基上產(chǎn)毒最佳,可能是因為PDA培養(yǎng)基中含有馬鈴薯和葡萄糖,而馬鈴薯中含有淀粉、蛋白質(zhì)、脂肪、粗纖維,還含有豐富的鈣、磷、鐵、鉀等礦物質(zhì)及VC、VA和B族類維生素,營養(yǎng)豐富;其次是因為葡萄糖作為優(yōu)質(zhì)碳源可為硫色曲霉生長提供豐富的碳源,進而使其產(chǎn)毒量較高,所以PDA是觀察硫色曲霉產(chǎn)毒的最佳培養(yǎng)基。


硫色曲霉在CYA和PDA培養(yǎng)基上生長較好,僅次于YES培養(yǎng)基,但在CYA和YES培養(yǎng)基上不產(chǎn)毒,這是因為盡管CYA培養(yǎng)基中所含有的碳源可以滿足硫色曲霉的生長,但其培養(yǎng)基中所含有的硝酸鈉會抑制OTA的產(chǎn)生,所以CYA和PDA培養(yǎng)基可用于觀察硫色曲霉的生長,而PDA培養(yǎng)基可同時用于觀察硫色曲霉的生長和產(chǎn)毒。

硫色曲霉在天然培養(yǎng)基上的產(chǎn)毒量比較


天然培養(yǎng)基不適宜觀察硫色曲霉的生長情況,因為天然培養(yǎng)基本身的成分會對硫色曲霉DNA和RNA的提取造成影響,也不利于觀察其孢子形態(tài)。硫色曲霉在天然培養(yǎng)基上的產(chǎn)毒量較高,在花生培養(yǎng)基上產(chǎn)毒量最高,可以達到14.04 mg·kg-1,小麥、玉米、水稻也會因為硫色曲霉的污染而產(chǎn)生赭曲霉毒素,但花生中更容易因硫色曲霉污染而產(chǎn)生赭曲霉毒素,這可能是由花生中脂肪、蛋白質(zhì)含量最為豐富所致。研究不同群體密度的赭曲霉孢子侵染糧食的規(guī)律時發(fā)現(xiàn),低密度和高密度赭曲霉污染花生、大豆、玉米、小麥等農(nóng)作物后,花生和大豆的發(fā)芽率下降最多,說明脂肪及蛋白質(zhì)含量高的糧食可能更容易受到赭曲霉的污染,這與本研究發(fā)現(xiàn)的硫色曲霉的侵染規(guī)律類似。

本研究發(fā)現(xiàn),固體培養(yǎng)基上,硫色曲霉在YES培養(yǎng)基上生長最好,菌絲最發(fā)達,但不產(chǎn)毒,可用于觀察硫色曲霉的生長特性。改變YES培養(yǎng)基的pH發(fā)現(xiàn),pH值為8時最適宜硫色曲霉生長,偏中性和弱堿性環(huán)境適合硫色曲霉生長,酸性環(huán)境抑制其生長。在PDA培養(yǎng)基上的生長情況僅次于YES培養(yǎng)基,同時有最高產(chǎn)毒量,所以PDA培養(yǎng)基可用于OTA的生長和產(chǎn)毒特性研究。谷物等農(nóng)產(chǎn)品會因為硫色曲霉的污染而產(chǎn)生赭曲霉毒素,硫色曲霉在天然培養(yǎng)基上的OTA產(chǎn)毒能力表現(xiàn)為花生>小麥>玉米>水稻。


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