本實(shí)驗(yàn)旨在研究玉竹多糖-乳酸桿菌體外合生發(fā)酵的條件、繪制其生長(zhǎng)曲線,進(jìn)而制備合生元,為玉竹多糖合生元飼料添加劑的開(kāi)發(fā)提供基礎(chǔ)。


乳桿菌生長(zhǎng)曲線及種子液培養(yǎng)時(shí)間的確定


乳桿菌CICC20261的生長(zhǎng)曲線可以看出,在0~8 h之間,乳桿菌生長(zhǎng)緩慢,8~12 h之間生長(zhǎng)迅速,而在12 h后,生長(zhǎng)趨于平緩,此時(shí)乳桿菌處于生長(zhǎng)的穩(wěn)定期,此時(shí)菌液活菌數(shù)高,菌液濃度大。因此,12 h可以作為乳桿菌CICC20261種子液的培養(yǎng)時(shí)間。


乳桿菌在不同PH中的生長(zhǎng)曲線


不同pH值下乳桿菌的生長(zhǎng)情況可以看出,培養(yǎng)基的初始pH值對(duì)乳桿菌的生長(zhǎng)影響較大,在pH 3.5~4.5時(shí),乳桿菌的生長(zhǎng)受到抑制。同樣,偏堿性的環(huán)境對(duì)乳桿菌的生長(zhǎng)也有抑制,在pH大于7.5時(shí),乳桿菌的生長(zhǎng)趨勢(shì)明顯小于在pH4.5~7.0之間。通過(guò)比較發(fā)現(xiàn),在pH5.0時(shí)乳桿菌的生長(zhǎng)趨勢(shì)最好,因此確定適宜的初始pH值為5.0。


乳桿菌在不同接種量下的生長(zhǎng)趨勢(shì)


不同接種量下乳桿菌的生長(zhǎng)曲線可以看出,隨著接種量的提高,乳桿菌的在12 h內(nèi)的OD值是不斷增大的。接種量為4%的OD值與接種量為6%的OD值差異并不明顯,從節(jié)省接種量的方面考慮,確定最適宜的接種量為4%。


乳桿菌在不同溫度下的生長(zhǎng)曲線


不同培養(yǎng)溫度下乳桿菌的生長(zhǎng)曲線可以看出,在34℃下乳桿菌的生長(zhǎng)趨勢(shì)最好。因此,選擇34℃為乳桿菌的最適宜培養(yǎng)溫度。


乳桿菌在不同多糖濃度下的生長(zhǎng)曲線


乳桿菌在不同濃度的YZP下的生長(zhǎng)曲線可以看出,隨著YZP濃度的增加,在培養(yǎng)的前6 h期間,乳桿菌的生長(zhǎng)隨著多糖濃度的增加而增加。培養(yǎng)6h后,乳桿菌的生長(zhǎng)趨于平緩。從節(jié)省YZP的用量和縮短培養(yǎng)時(shí)間的角度考慮,確定YZP的最佳加入量為6.0 g/L,培養(yǎng)時(shí)間為10h。


為了確定乳酸菌-玉竹多糖合生元的最佳發(fā)酵工藝,本實(shí)驗(yàn)通過(guò)考察乳桿菌CICC20261的最適生長(zhǎng)條件,確定了乳桿菌的最佳活化培養(yǎng)時(shí)間為12 h,初始培養(yǎng)基pH值為5.0,接種量為4%,培養(yǎng)溫度為34℃。在此基礎(chǔ)上考察了玉竹多糖的最佳加入量和培養(yǎng)時(shí)間,玉竹多糖加入量為6 g/L,培養(yǎng)時(shí)間為10 h。最終在優(yōu)選的培養(yǎng)條件下,制備了玉竹多糖合生元。


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