2.3不同培養(yǎng)基對DH 066和F 107菌絲生長的影響
不同培養(yǎng)基對DH 066和F 107生長速度的影響分別見圖4和圖5。從圖4可知，DH 066在相同的培養(yǎng)溫度(25℃)下，其生長速度快慢依次排列為10 g/L WBWA≈10 g/L CMWA>10 g/L WBA>20 g/L DIA>10 g/L CMA>20 g/L DA。于10 g/L WBWA和10 g/L CMWA培養(yǎng)基中生長最佳，5 d就已長滿整個(gè)平皿；20 g/L DA生長最差，10 d才能覆蓋整個(gè)平皿。從圖5可知，F(xiàn) 107在相同的培養(yǎng)溫度(25℃)下，其生長速度快慢依次排列為10 g/L WBWA>10 g/L CMWA>10 g/L WBA>20 g/L DIA≈10 g/L CMA>20 g/L DA。于10 g/L WBWA培養(yǎng)基中生長最佳，6 d長滿整個(gè)平皿；20 g/L DA生長最差，10 d還未覆蓋整個(gè)平皿。往往菌絲在最后1 d生長速度減慢(斜率小)，這是由于菌絲長滿整個(gè)平皿所致。
圖4捕食線蟲性真菌少孢節(jié)叢孢菌DH 066于6種不同培養(yǎng)基中的生長情況
圖5捕食線蟲性真菌少孢節(jié)叢孢菌F 107于6種不同培養(yǎng)基中的生長情況
3討論
本研究表明DH 066在20 g/L DA培養(yǎng)基中的分生孢子明顯要比其他培養(yǎng)基中的大，而F 107在10 g/L CMA中的分生孢子要比其他培養(yǎng)基的大，Singh R K等研究發(fā)現(xiàn)，在牛肉膏瓊脂培養(yǎng)基中培養(yǎng)的A.oligospora，其分生孢子長度最長可達(dá)51.0μm，在營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基中最長可達(dá)40μm，而在Richard’s，YPSS，Sabouraud’s，PDA和CMA培養(yǎng)基中，分生孢子最長為30.50μm，在含有線蟲的CMA培養(yǎng)基中產(chǎn)生的分生孢子要比不加線蟲的CMA培養(yǎng)基中的大。Haaed K研究表明在含有線蟲的培養(yǎng)基中的分生孢子比不加線蟲的培養(yǎng)基中要小，這與Singh R K的研究結(jié)果相反，這種結(jié)果可能由于同種不同株導(dǎo)致的。這說明同一株少孢節(jié)叢孢菌在不同培養(yǎng)基中分生孢子大小不同，并且也說明同種不同株的分生孢子在同種培養(yǎng)基中分生孢子大小也不同。因此，鑒于在不同培養(yǎng)基中分生孢子的大小和形態(tài)有所差異，因此在鑒定種時(shí)，應(yīng)統(tǒng)一在CMA培養(yǎng)基中測量孢子大小，并進(jìn)行鑒定。
Cooke R C等描述A.oligospora分生孢子倒卵形，分生孢子1個(gè)分隔并在分隔處溢縮，分生孢子梗不分枝。Haaed K研究表明，A.oligospora在CMA培養(yǎng)基中產(chǎn)生的分生孢子倒卵形至梨形，分生孢子1個(gè)分隔，末端細(xì)胞是頂端細(xì)胞的2倍，分生孢子梗不分枝，以及國內(nèi)對該種不同分離株也有不少描述，但沒有報(bào)道過該種偶爾產(chǎn)生2個(gè)分隔的分生孢子以及分生孢子梗偶爾分枝的現(xiàn)象。
在10 g/L WBWA和10 g/L CMWA培養(yǎng)基中，DH 066和F 107菌絲生長速度最快，在10 g/L WBA培養(yǎng)基兩株菌的生長速度略比10 g/L WBWA和10 g/L CMWA慢，但要遠(yuǎn)遠(yuǎn)快于10 g/L CMA。這表明WBA培養(yǎng)基要比CMA培養(yǎng)基更適合培養(yǎng)A.oligospora，也表明自來水比蒸餾水更適合培養(yǎng)該菌。但并不是營養(yǎng)越高菌絲生長速度越快，我們研究資料表明，在20 g/L CMA以及PDA培養(yǎng)基中，菌絲生長速度較慢，明顯要比4 g/L和10 g/L CMA慢，這與楊曉野等的試驗(yàn)結(jié)論一致。在相同培養(yǎng)基中DH 066生長速度明顯要比F 107快，這說明不同分離株的確存在差異。
在10 g/L WBA培養(yǎng)基中所產(chǎn)生的分生孢子的量比在10 g/L CMA及20 g/L DIA明顯要多，這說明麩皮培養(yǎng)基不僅適合于A.oligospora的生長，也適合于大量生產(chǎn)分生孢子。麩皮價(jià)格相比玉米和其他糧食更低，從實(shí)用性的角度來說，更適合于今后的大規(guī)模生產(chǎn)。
早在20世紀(jì)20年代，Nathan Cobb就提出用線蟲的天敵來防治線蟲，直到1978年Coyrol J C等才成功地用強(qiáng)力節(jié)叢孢(A.robusta，商品名：Royale 300)防治蘑菇生產(chǎn)上線蟲的危害；于1983年，Coyrol J C將A.irregularis(商品名：Royale 350)用于番茄生產(chǎn)中對根結(jié)線蟲的防治。目前，國內(nèi)也有用于植物線蟲的產(chǎn)品，如淡紫擬青霉(Paecilomyceslilacinus，商品名：滅線寧)，厚孢輪枝菌(Pochoniachlamydosporia，商品名：線蟲必克)。但用于家畜寄生線蟲的生防治劑還沒有商品化，因?yàn)橛糜趧游锛纳€蟲防治的菌種需添加到家畜飼料中讓其采食，這樣既節(jié)約成本，又方便實(shí)施。因此，要求菌種必須能夠通過家畜的消化道，與植物生防菌種相比，對菌種要求更高。由于本次研究的2株A.oligospora來源于糞堆和新鮮糞便，已通過家畜的消化道，說明其可能對家畜胃腸道的pH、酶等具有一定的耐受性，但還需進(jìn)一步進(jìn)行體內(nèi)試驗(yàn)以驗(yàn)證其通過家畜胃腸道的生存活力。
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