為了觀察捕食線蟲性真菌少孢節(jié)叢孢菌不同分離株在不同培養(yǎng)基中的形態(tài)學(xué)特性及生長情況，將少孢節(jié)叢孢菌分離株DH 066和F 107接種于10 g/L麩皮瓊脂(WBA)培養(yǎng)基、10 g/L玉米粉瓊脂(CMA)培養(yǎng)基、20 g/L葡萄糖離子瓊脂(DIA)培養(yǎng)基和20 g/L葡萄糖瓊脂(DA)培養(yǎng)基中，置于25℃恒溫箱培養(yǎng)，觀察不同分離株在不同培養(yǎng)基中的形態(tài)學(xué)特性并測定其產(chǎn)孢量。對2個分離株在6種不同培養(yǎng)基中菌絲生長長度每天進行定時測量。結(jié)果表明，該菌在4種培養(yǎng)基中的特征為分生孢子梨形至倒卵形，1個分隔，偶見2個分隔，分生孢子梗無色，直立，分隔，偶見分枝，分生孢子在10 g/L WBA產(chǎn)量最大。此外，對2個分離株在不同培養(yǎng)基中生長速度研究表明，該菌在10 g/L麩皮自來水瓊脂(WBWA)培養(yǎng)基和10 g/L玉米粉自來水瓊脂(CMWA)培養(yǎng)基中生長最快。
節(jié)叢孢屬(Arthrobotrys)最早是由Corda于1839根據(jù)模式種多孢節(jié)叢孢菌(A.superba)而建立，少孢節(jié)叢孢菌(A.oligospora)是Fresenius于1852年首次發(fā)現(xiàn)，但當時并沒有發(fā)現(xiàn)其具有捕食能力，直到1888年，Zopf才觀察到該菌捕食線蟲，并對黏性網(wǎng)進行了描述。A.oligospora是廣泛分布于自然界的一種捕食線蟲性真菌，從土壤、牛羊糞便、糞堆、爛菜葉、垃圾和水中都曾分離到，并且是大部分棲息地中的優(yōu)勢種，說明該菌具較強的抵抗外界環(huán)境變化的能力及對環(huán)境適應(yīng)能力強。
國內(nèi)外對捕食線蟲性真菌A.oligospora已進行了大量的研究，如用傳統(tǒng)分類法對A.oligospora進行鑒定，Jansson H B等、滿達等通過掃描電鏡對A.oligospora的形態(tài)和分生孢子直接產(chǎn)生捕食結(jié)構(gòu)及捕食全過程的動態(tài)學(xué)進行了觀察，Murray D S等用微分干涉差顯微鏡對其捕食過程中刺入階段形成的感染球(初級感染球和二級感染球)進行詳細觀察和描述，但沒有記載A.oligospora能產(chǎn)生2個隔的分生孢子及分生孢子梗分枝的現(xiàn)象。楊玉琴等、Singh R K等對在不同溫度、不同pH及不同培養(yǎng)基生長的理化特性進行研究，但未記載A.oligospora在麩皮培養(yǎng)基中菌絲生長狀況及分生孢子產(chǎn)量的研究。
雖然國內(nèi)對該菌有不少研究，但由于每株菌來源不同、分離地地理環(huán)境、氣候不同，對該菌的形態(tài)學(xué)及生物學(xué)特性也存在差異，DH 066和F 107來源于糞堆和新鮮糞便，說明已經(jīng)通過1次消化道。鑒于此，本試驗對生長于4種不同培養(yǎng)基的DH 066和F 107進行詳細的形態(tài)學(xué)觀察和在6種培養(yǎng)基中生長狀況進行研究，以便為今后利用捕食線蟲性真菌進行家畜體內(nèi)寄生蟲的生物防治提供候選菌種。
1材料與方法
1.1材料
1.1.1菌種捕食線蟲性真菌——少孢節(jié)叢孢菌(A.oligospora)分離株DH 066是從浙江省溫州市平陽縣地區(qū)糞堆中分離純化獲得，分離株F 107是從吉林省長春市綠園區(qū)城地區(qū)新鮮綿羊糞便中分離純化獲得。菌種于20 g/L麩皮瓊脂斜面培養(yǎng)基4℃保存。
1.1.2培養(yǎng)基20 g/L葡萄糖瓊脂(dextrose agar,DA)培養(yǎng)基：稱取瓊脂粉20 g，加900 mL蒸餾水，121℃高壓滅菌20 min后，加入100 mL已用115℃高壓蒸汽滅菌15 min的含量為200 g/L的葡萄糖，然后傾注于滅菌培養(yǎng)皿中，備用。
20 g/L葡萄糖離子瓊脂(dextrose ionized agar,DIA)培養(yǎng)基：稱取瓊脂粉20 g，MgSO40.5 g，K2HPO41 g，加900 mL蒸餾水，121℃高壓滅菌20 min后，加入100 mL已用115℃高壓滅菌15 min的含量為200 g/L的葡萄糖，倒置平皿，備用。
10 g/L麩皮瓊脂(wheat bran agar,WBA)培養(yǎng)基：稱取新鮮麩皮40 g，加入1 000 mL蒸餾水，微火煮沸1 h后，4層～6層紗布過濾，補蒸餾水至1 000 mL，濾液置于4℃冰箱沉淀過夜，虹吸上清液，制成原液。取原液250 mL加蒸餾水至1 000 mL，加入瓊脂粉20 g，121℃高壓滅菌20 min后，傾注于滅菌培養(yǎng)皿中，備用。
10 g/L麩皮自來水瓊脂(wheat bran water agar,WBWA)培養(yǎng)基：方法同上，僅將蒸餾水換成自來水。
10 g/L玉米粉瓊脂(corn meal agar,CMA)培養(yǎng)基：方法同上，用蒸餾水，麩皮換成玉米粉。
10 g/L玉米粉自來水瓊脂(corn meal water agar,CMWA)培養(yǎng)基：方法同上，用自來水。
4 g/L玉米粉瓊脂(corn meal agar,CMA)培養(yǎng)基：方法同上，用蒸餾水將40 g/L的玉米粉瓊脂原液稀釋10倍。
相關(guān)新聞推薦
1、高密度發(fā)酵的過程中乙酸抑制重組大腸桿菌生長及外源基因的表達——結(jié)果
2、人參外泌體改變巨噬細胞極化狀態(tài)，抑制非小細胞肺癌細胞的生長的分子機制（三）
3、低pH對釀酒酵母酒精發(fā)酵的影響及酵母應(yīng)答酸脅迫機制初探