分離株血清型鑒定：58株LM分離株血清型分為3種：1/2a型5株（8.62%），1/2b型26株（44.83%），1/2c型27株（46.55%）。優(yōu)勢血清型為1/2b和1/2c。
分離株MLST分型：58株LM分離株的ST型分為19種（包括ST1,ST2,ST5,ST8,ST9,ST14,ST18,ST21,ST26,ST29,ST31,ST34,ST87,ST108,ST115,ST120,ST121,ST122,ST619）和11個克隆群（CC）。均屬于譜系Ⅰ（包含所有1/2b血清型）和譜系Ⅱ（包含所有1/2a和1/2c血清型）。其中ST2型最多（8株）；ST9,ST34和ST122同屬于CC9克隆群，其數(shù)量最多（12株）。優(yōu)勢克隆群為CC9（12株），CC2（8株）。
細(xì)菌生長曲線：25株被測LM分離株與參考株ATCC19115的生長曲線趨勢基本一致。在5h進(jìn)入對數(shù)生長期，8h后逐漸進(jìn)入平臺期。大多數(shù)被測分離株的生長能力高于參考株。
細(xì)菌生物被膜形成能力：參考株ATCC19115在595nm處的吸光度為1.8281。除分離株DX2023LM18（1.9670）與QY2023LM04（1.9523）外，其余23株被測分離株的吸光度均在2.0以上，其中TS2023LM13與QY2023LM06的吸光度最高，均為約3.3377（圖3）。
消毒劑對分離菌株的MIC：參考株ATCC19115對0.2%甲醛溶液、0.2%苯扎溴銨、0.5%碘溶液和2%氫氧化鈉的MIC值分別為125μg/mL、125μg/mL、312.5μg/mL和1250μg/mL。對每種消毒劑，均有7～10株被測LM分離株的MIC值高于參考株ATCC19115（表6）。
討論
LM作為重要的食源性致病菌，其引發(fā)的李斯特菌病病死率高，特別是新生兒。本次調(diào)查顯示甘肅省畜禽屠宰環(huán)節(jié)存在LM污染（總分離率4.68%），定西市（8.90%）和天水市（9.85%）分離率較高，提示當(dāng)?shù)赝涝讏鲂杓訌?qiáng)對該菌的監(jiān)控。胴體表面（7.33%）和器具環(huán)境（4.80%）檢出率較高，為肉品主要污染途徑。
血清分型檢出致病性血清型1/2a、1/2b和1/2c，其中1/2b（44.83%）和1/2c（46.55%）為優(yōu)勢血清型（國內(nèi)部分研究報道1/2a為優(yōu)勢型）。MLST分型顯示遺傳多樣性（19個ST），均屬譜系I或II。優(yōu)勢克隆群為CC9（12株）和CC2（8株）。值得注意的是，分離到ST1,ST2,ST5,ST8,ST9等5種在國際上報道常引起人類李斯特菌病的ST型（占32.1%），存在潛在公共衛(wèi)生風(fēng)險。
生物學(xué)特性研究表明，被測LM分離株的生長能力大多強(qiáng)于參考株ATCC19115。生物被膜形成能力普遍較高（大多OD595>2.0），且譜系II（1/2a,1/2c）菌株通常強(qiáng)于譜系I（1/2b）菌株，這增強(qiáng)了菌株在環(huán)境中的定植能力和生存優(yōu)勢。更關(guān)鍵的是，被測LM分離株對常用的屠宰場消毒劑（甲醛溶液、苯扎溴銨、碘溶液、氫氧化鈉）均表現(xiàn)出更強(qiáng)的耐受性，MIC值普遍高于參考株ATCC19115。推測這與屠宰環(huán)境復(fù)雜、殘留有機(jī)物及消毒不規(guī)范（如消毒前清潔不徹底、消毒后沖洗不完全）導(dǎo)致細(xì)菌長期暴露于亞致死濃度的消毒劑中相關(guān)。
本次調(diào)查未分離到高致病性4b血清型（該型主要從臨床分離）。綜合結(jié)果分析，甘肅省畜禽屠宰環(huán)節(jié)存在LM污染，優(yōu)勢血清型為1/2b和1/2c，分離菌株在生長速度、生物被膜形成能力和消毒劑耐受性方面表現(xiàn)出較強(qiáng)的環(huán)境適應(yīng)性。部分分離株屬于高致病性克隆群。消毒效果不佳（衛(wèi)生死角、殘留有機(jī)物干擾消毒）是LM持續(xù)存在和產(chǎn)生抗性的重要原因。
相關(guān)新聞推薦
1、重組大腸桿菌E.coli B0013-1050的琥珀酸生成新途徑，L-蘋果酸產(chǎn)量提高到14 g/L
2、水飛薊賓聯(lián)合臨床常用抗菌素對感染細(xì)菌的體外抑制作用