2結(jié)果


2.1胰島素對病原線蟲卡森斯氏線蟲0657L共生細(xì)菌伯氏致病桿菌0657L菌落直徑的影響


1∶500和1∶5 000濃度胰島素處理0～1 d時(shí)伯氏致病桿菌0657L生長較慢，所有單菌落均未長出;2～6 d時(shí)，與空白對照組(CK)相比，1∶500和1∶5 000濃度胰島素處理組伯氏致病桿菌0657L菌落直徑顯著增大(P<0.05)，且低濃度(1∶5 000)胰島素處理組菌落直徑與高濃度(1∶500)濃度胰島素處理組相比促進(jìn)作用更明顯，但二者之間沒有顯著差異(P>0.05)。在整個(gè)觀察時(shí)間段內(nèi)，除1 d時(shí)各處理組未生長外，2～6 d時(shí)，1∶5 000濃度胰島素下，菌落直徑分別為2.89，3.68，4.06，4.52和4.85 mm，較空白對照組分別增大77.2%，27.6%，19.8%，19.5%和17.6%;與空白對照組相比，1∶500濃度胰島素處理組菌落直徑分別增大54.0%，20.1%，14.2%，15.1%和14.9%(圖1，2)。

圖1 1∶500和1∶5 000濃度胰島素下伯氏致病桿菌0657L培養(yǎng)3 d時(shí)的單菌落形態(tài)

圖2 1∶500和1∶5 000濃度胰島素下伯氏致病桿菌0657L菌落直徑

圖3 1∶500和1∶5 000濃度胰島素下伯氏致病桿菌0657L生長速率


2.2胰島素對伯氏致病桿菌0657L生長速率的影響


根據(jù)伯氏致病桿菌0657L的生長速率繪制曲線圖(圖3)，伯氏致病桿菌0657L的生長速率在整個(gè)實(shí)驗(yàn)周期內(nèi)呈現(xiàn)由快至慢的趨勢，符合邏輯斯蒂生長曲線。1～2 d時(shí)，由于菌落生長緩慢，顯微鏡下觀察不到明顯菌落，即為延緩期;2～3 d時(shí)，菌落快速生長，即為對數(shù)生長期，共生細(xì)菌生長速度最快;1∶500和1∶5 000胰島素處理組共生細(xì)菌生長速率較空白對照組(CK)和林格氏液組顯著(P<0.05)加快，分別由空白對照組的68.0μm/d提高至104.7和120.4μm/d。1∶500胰島素處理組較空白對照組和林格氏液組分別加快36.7和30.6μm/d，1∶5 000濃度下，較空白對照組和林格氏液組分別加快52.5和46.4μm/d，但高濃度(1∶500)處理組與低濃度(1∶5 000)處理組之間無顯著差異(P>0.05)。3～7 d時(shí)，菌落的生長速率明顯變慢，后逐漸趨于平穩(wěn)，即為穩(wěn)定期。


2.3胰島素對卡森斯氏線蟲0657L壽命的影響


結(jié)果表明(圖4)，取食不同濃度胰島素處理的伯氏致病桿菌0657L可以延長自然狀態(tài)下卡森斯氏線蟲0657L壽命。與空白對照組(CK)相比，取食1∶5 000胰島素處理的伯氏致病桿菌0657L后卡森斯氏線蟲0657L的平均壽命由11.0 d延長至14.0 d，延長了27.3%，1∶500濃度胰島素處理組較1∶5 000處理組的效果更好，卡森斯氏線蟲0657L平均壽命為16.0 d，延長了45.5%。綜上所述，不同濃度胰島素均可以延長卡森斯氏線蟲0657L壽命，但兩處理濃度胰島素處理組之間差異不顯著(P>0.05)。

圖4取食1∶500和1∶5 000濃度胰島素處理48 h時(shí)的伯氏致病桿菌0657L后卡森斯氏線蟲0657L的壽命


2.4胰島素對卡森斯氏線蟲0657L運(yùn)動(dòng)能力的影響


結(jié)果如圖5所示，與空白對照組(CK)相比，卡森斯氏線蟲0657L在3齡幼蟲期(胰島素處理3 d時(shí))，胰島素的補(bǔ)充可顯著加快卡森斯氏線蟲0657L的每30 s頭部擺動(dòng)次數(shù)，取食1∶5 000和1∶500胰島素處理的伯氏致病桿菌0657L后卡森斯氏線蟲0657L頭部擺動(dòng)頻率由28.4次/30 s分別加快到44.4次/30 s和49.6次/30 s，分別顯著提高了56.3%和74.7%(P<0.05)?？ㄉ故暇€蟲0657L在4齡幼蟲期(胰島素處理7 d時(shí))，與空白對照組相比，取食高濃度(1∶500)胰島素處理的伯氏致病桿菌0657L后卡森斯氏線蟲0657L頭部擺動(dòng)頻率為57.2次/30 s，顯著提高了47.4%(P<0.05);而取食低濃度(1∶5 000)胰島素處理的伯氏致病桿菌0657L后卡森斯氏線蟲0657L頭部擺動(dòng)頻率無顯著差異(P>0.05)。而在卡森斯氏線蟲0657L生命的后期成蟲期(胰島素處理11 d時(shí))，運(yùn)動(dòng)能力較3齡幼蟲略強(qiáng)，較4齡幼蟲期略弱，但與空白對照組相比，不同濃度的胰島素加入對線蟲的運(yùn)動(dòng)能力均有所提高，但并無顯著差異(P>0.05)。綜上所述，胰島素的補(bǔ)充有助于卡森斯氏線蟲0657L抵御運(yùn)動(dòng)能力的衰退，且不同濃度處理組的效果也不同，高濃度對線蟲運(yùn)動(dòng)能力衰退的延緩作用更強(qiáng)。

圖5取食1∶500和1∶5 000濃度胰島素處理48 h時(shí)的伯氏致病桿菌0657L后卡森斯氏線蟲0657L的每30 s頭部擺動(dòng)次數(shù)


2.5胰島素對卡森斯氏線蟲0657L吞咽能力的影響


結(jié)果顯示(圖6)，胰島素的補(bǔ)充在卡森斯氏線蟲0657L 3齡幼蟲期(胰島素處理3 d時(shí))、4齡幼蟲期(胰島素處理7 d時(shí))和成蟲期(胰島素處理11 d時(shí))均可顯著提高卡森斯氏線蟲0657L的吞咽能力。與空白對照組(CK)相比，3齡幼蟲期時(shí)，取食1∶5 000和1∶500胰島素處理的伯氏致病桿菌0657L后，卡森斯氏線蟲0657L吞咽頻率由11.0次/30 s分別提高到16.6次/30 s和18.2次/30 s，分別顯著提高了50.9%和65.5%(P<0.05);4齡幼蟲期時(shí)吞咽頻率由14.2次/30 s分別提高到18.0次/30 s和19.2次/30 s，分別顯著提高了26.8%和35.2%(P<0.05);11 d時(shí)吞咽頻率由11.8次/30 s分別提高到14.6次/30 s和15.0次/30 s，分別顯著提高了23.7%和21.1%(P<0.05)。而且同運(yùn)動(dòng)能力一樣，成蟲期較3齡幼蟲期略強(qiáng)，較4齡幼蟲期略弱。綜上所述，胰島素能夠提高卡森斯氏線蟲0657L吞咽頻率，且不同濃度處理組促進(jìn)作用略有差異，高濃度較低濃度對吞咽能力的促進(jìn)作用更明顯。

圖6取食1∶500和1∶5 000濃度胰島素處理48 h時(shí)的伯氏致病桿菌0657L后卡森斯氏線蟲0657L的每30 s吞咽次數(shù)



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