2結(jié)果與分析
2.1 COR處理番茄葉片后基因表達(dá)分析
2.1.1乙烯信號(hào)途徑相關(guān)基因的相對(duì)表達(dá)量
從圖1中可以看出,所有處理組中的EIN2基因和EIN3基因的表達(dá)量均顯著高于對(duì)照組。對(duì)于EIN2基因來說,各處理組中表達(dá)量最高的為1μmol/L組,相對(duì)表達(dá)量最低的為0.001μmol/L組,1μmol/L組的表達(dá)量顯著高于0.1μmol/L組,0.01μmol/L組,和0.001μmol/L組。0.1μmol/L組,0.01μmol/L組和0.001μmol/L濃度的COR誘導(dǎo)EIN2沒有顯著差異。與EIN2基因表達(dá)類似,EIN3基因相對(duì)表達(dá)量最高的處理組為1μmol/L組,顯著高于其他3個(gè)處理組,表明COR在高濃度時(shí)對(duì)EIN2基因和EIN3基因具有較強(qiáng)的誘導(dǎo)作用。
圖1不同濃度COR處理下乙烯相關(guān)基因的表達(dá)水平
2.1.2茉莉酸合成和信號(hào)途徑相關(guān)基因的相對(duì)表達(dá)量
從圖2可以看出,除0.1μmol/L外,其他處理組中的LoxD基因和MYC2基因的表達(dá)量均與對(duì)照組差異顯著,且同一處理組中兩個(gè)基因的變化趨勢(shì)相同。1μmol/L COR處理組中的LoxD基因和MYC2基因的表達(dá)量顯著高于對(duì)照組,表明高濃度COR能夠誘導(dǎo)番茄葉片表達(dá)LoxD基因和MYC2基因。0.01μmol/L COR處理組和0.001μmol/L COR處理組中的LoxD基因和MYC2基因的表達(dá)量顯著低于對(duì)照組,表明低濃度和較低濃度COR處理抑制了番茄葉片LoxD基因和MYC2基因的表達(dá)。
圖2不同濃度COR處理下茉莉酸相關(guān)基因的表達(dá)水平
2.1.3 PR1a基因的相對(duì)表達(dá)量
從圖3中可以看出,除1μmol/L處理組外,其余各處理組PR1a基因的表達(dá)量均低于對(duì)照組,其他處理組與對(duì)照組間差異顯著,0.1μmol/L處理組分別與0.01μmol/L和0.001μmol/L處理組均無明顯差異,而0.01μmol/L和0.001μmol/L處理組差異顯著,整體來說COR能夠抑制葉片PR1a基因的表達(dá)。0.01μmol/L處理組的PR1a基因表達(dá)量在4個(gè)處理組中最低,僅為1μmol/L處理組的0.24倍,較低濃度COR對(duì)PR1a基因表達(dá)的抑制作用最強(qiáng)。
圖3不同濃度COR處理下PR1a基因的表達(dá)水平
2.1.4 PAL5基因的相對(duì)表達(dá)量
從圖4中可以看出,各濃度COR處理番茄葉片均能誘導(dǎo)PAL5基因的表達(dá)。1、0.1、0.01、0.001μmol/L處理組的PAL5基因平均相對(duì)表達(dá)量分別為307.11、241.76、169.35和171.39。0.1μmol/L處理組分別與1μmol/L和0.01μmol/L處理組之間無明顯差異,0.01μmol/L處理組和0.001μmol/L處理組無明顯差異??偟膩碚f,隨著COR濃度的增高,PAL5基因的表達(dá)量呈上升趨勢(shì)。
圖4不同濃度COR處理下PAL5基因的表達(dá)水平
2.2細(xì)菌生長能力測(cè)定
從圖5中可以看出,野生型菌株P(guān)to在番茄葉片中的生長能力極顯著高于COR缺失突變體cor-。同一接種濃度下接種不同菌株72 h后,葉片中Pto的種群密度為7.32×107CFU/cm2,cor-的種群密度為1.44×107CFU/cm2,Pto的種群密度約為cor-的5倍,表明病原菌不能分泌冠菌素后,病原菌的生長量明顯減少,說明COR能夠促進(jìn)病原菌在宿主植物中的生長。
圖5不同菌株生長能力測(cè)定
2.3胼胝質(zhì)沉積分析
胼胝質(zhì)是植物抵御病原菌入侵的物理屏障。從圖6中可以看出,處理組誘導(dǎo)的胼胝質(zhì)沉積數(shù)量極顯著高于對(duì)照組,同時(shí)Pto處理組的胼胝質(zhì)沉積數(shù)量極顯著低于cor-處理組。熒光染色葉片觀測(cè)結(jié)果表明,接種細(xì)菌之后,番茄葉片啟動(dòng)誘導(dǎo)胼胝質(zhì)沉積的基礎(chǔ)防御,而COR促進(jìn)細(xì)菌一定程度上抑制胼胝質(zhì)沉積,從而抑制植物防御。
圖6不同處理誘導(dǎo)的胼胝質(zhì)沉積
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