對費氏丙酸桿菌（Propionibacterium freudenreichii CS1420）發(fā)酵培養(yǎng)基的碳源進行優(yōu)化，旨在提高菌體密度。結(jié)果表明，以乳酸鈉作為單一碳源時，當乳酸鈉添加量為32 g/L時，菌體生長量最大，OD600nm為1.95；以葡萄糖作為單一碳源時，當葡萄糖添加量為8 g/L時，菌體生長量最大，OD600nm為1.242；以乳酸鈉和葡萄糖作為復合碳源時，當碳源添加量為18.8g/L乳酸鈉+1.2g/L葡萄糖時，菌體生長量最大，OD600nm為2.06，這說明，復合碳源可以有效的提高菌體密度。
近年來，天然防腐劑的開發(fā)應用受到了廣泛的重視。其中，天然防腐劑中的微生物源天然防腐劑乳酸鏈球菌素（Nisin）在1969年被FAO/WHO批準為高效安全天然食品防腐劑；ε-聚賴氨酸（ε-PL）于2003年10月被FDA批準為安全食品保鮮劑，美國、韓國和日本已經(jīng)允許ε-PL應用于食品防腐中；曲酸在食品防腐保鮮等方面有著廣闊的應用；溶菌酶已廣泛的應用于肉制品、水產(chǎn)品和乳制品等食品防腐中。另外，納他霉素、甲烷氧化菌素、羅伊氏菌素等在食品工業(yè)中也有一定的應用。
通過研究發(fā)現(xiàn)，丙酸桿菌代謝物也具有一定的抑菌活性，梁新樂、諸曉強、賈彩鳳等人初步探討了丙酸桿菌代謝物做為防腐劑在食品工業(yè)中的應用。本文以一株費氏丙酸桿菌（Propionibacterium freudenreichii CS1420）為考察對象，前期的研究發(fā)現(xiàn)，該丙酸桿菌代謝物對大腸桿菌、酵母菌、金葡菌及霉菌等都有一定的抑制作用，本文主要研究葡萄糖、乳酸鈉對丙酸桿菌生長的影響，旨在提高菌體密度為后續(xù)的培養(yǎng)基優(yōu)化，高密度培養(yǎng)等一系列實驗奠定理論基礎。
1材料與方法
1.1菌種
費氏丙酸桿菌（Propionibacterium freudenreichii CS1420，以下簡稱為P.freudenreichii CS1420）：常熟理工學院發(fā)酵工程技術研究中心保存。
1.2主要儀器
DHP-9162303A-5S型電熱恒溫培養(yǎng)箱、LHR-250型霉菌培養(yǎng)箱；YXQ-LS-100A型立式壓力蒸汽滅菌鍋；UV-2450型紫外-可見分光光度計；pH計：；FA604A型精密電子天平；Milli-Q Advantage超純水儀；SW-CJ-1B超凈工作臺；CR22GII型高速冷凍離心機。
1.3培養(yǎng)基
丙酸桿菌培養(yǎng)基（SLB培養(yǎng)基）：胰酶水解酪素10.0 g、酵母提取物5.0 g、乳酸鈉10.0 g，蒸餾水1 000 mL，pH 7.0～7.2。
1.4菌種活化
將斜面菌種劃線到平板SLB固體培養(yǎng)基上，于30℃厭氧罐中培養(yǎng)2.5 d，然后挑取平板上的單菌落劃線到斜面SLB固體培養(yǎng)基上，于30℃厭氧罐中培養(yǎng)2.5 d后取出放置4℃冰箱保存?zhèn)溆谩?
1.5生長曲線的測定
將活化好的P.freudenreichii CS1420接種到SLB培養(yǎng)基中，30℃厭氧培養(yǎng)32 h，每隔4小時吸取一定量的發(fā)酵液，以SLB液體培養(yǎng)基作為空白，在波長600 nm下測定發(fā)酵液吸光度，以此繪制菌株生長曲線。
1.6 P.Freudenreichii CS1420種子液的制備
挑取已經(jīng)活化好的斜面菌種接種到SLB培養(yǎng)基中，30℃厭氧培養(yǎng)24 h，制成種子液備用。
1.7碳源對菌株生長的影響
1.7.1葡萄糖對菌株生長的影響
以無乳酸鈉的SLB培養(yǎng)基為基礎，分別加入4、8、12、16、20 g/L的葡萄糖，分裝到5個100 mL三角瓶中，裝液量為100 mL，121℃滅菌20 min。然后按照10%接種量接入活化好的種子液，30℃厭氧培養(yǎng)24 h，在600 nm下，用UV-2450型紫外-可見分光光度計測定吸光度值。
1.7.2乳酸鈉對菌株生長的影響
以無乳酸鈉的SLB培養(yǎng)基為基礎，分別加入20、24、28、32、36 g/L的乳酸鈉，分裝到5個100 mL三角瓶中，121℃滅菌20 min。然后按照10%接種量接入活化好的種子液，30℃厭氧培養(yǎng)24 h，在600 nm下，用UV-2450型紫外-可見分光光度計測定吸光度值。
1.7.3復合碳源（乳酸鈉+葡萄糖）對菌株生長的影響
以無乳酸鈉的SLB培養(yǎng)基為基礎，分別加入17.6 g/L乳酸鈉+2.4 g/L葡萄糖、17.8 g/L乳酸鈉+2.2 g/L葡萄糖、18 g/L乳酸鈉+2 g/L葡萄糖、18.2 g/L乳酸鈉+1.8 g/L葡萄糖、18.4 g/L乳酸鈉+1.6 g/L葡萄糖、18.6 g/L乳酸鈉+1.4 g/L葡萄糖、18.8 g/L乳酸鈉+1.2 g/L葡萄糖、19 g/L乳酸鈉+1 g/L葡萄糖、19.2 g/L乳酸鈉+0.8 g/L葡萄糖、19.4 g/L乳酸鈉+0.6 g/L葡萄糖、19.6 g/L乳酸鈉+0.4 g/L葡萄糖、19.8 g/L乳酸鈉+0.2 g/L葡萄糖、20 g/L乳酸鈉+0 g/L葡萄糖分裝到5個100 mL三角瓶中，裝液量為100 mL，121℃滅菌20 min。然后按照10%接種量接入活化好的種子液，30℃厭氧培養(yǎng)24 h，在600 nm下，用UV-2450型紫外-可見分光光度計測定吸光度值。
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