沙門氏菌(Salmonella typhimurium)是一種革蘭氏陰性、細(xì)胞內(nèi)寄生的腸桿菌,廣泛存在于自然界中,不僅能引起畜禽及其它動(dòng)物發(fā)生急性、慢性或隱性感染,而且還能通過(guò)污染食品導(dǎo)致人發(fā)生食物中毒、胃腸炎、傷寒、敗血癥等疾病,是一種重要的食源性病原菌,對(duì)人類和動(dòng)物都有極大的危害,其中沙門氏菌相關(guān)性胃腸炎是全球所有沙門氏菌病病例中最常見(jiàn)的疾病,每年有近百萬(wàn)例患者死亡。沙門氏菌的致病機(jī)制涉及多種毒力因素,包括不同類型的分泌系統(tǒng)、被膜、質(zhì)粒和鞭毛等。其中鞭毛介導(dǎo)沙門氏菌的運(yùn)動(dòng),細(xì)菌運(yùn)動(dòng)使細(xì)菌能夠直接向營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)或感染目標(biāo)部位移動(dòng)。鞭毛在沙門氏菌的感染過(guò)程中起著核心作用,通過(guò)幫助宿主細(xì)胞的運(yùn)動(dòng),粘附和侵襲來(lái)促進(jìn)病原體的毒力。
在鞭毛的幫助下,病原體可以穿過(guò)粘液屏障并進(jìn)入上皮層。另外鞭毛還涉及生物膜形成、免疫系統(tǒng)調(diào)節(jié)等。鞭毛由三個(gè)主要結(jié)構(gòu)組成:基體、柔性鉤和細(xì)絲。鞭毛絲長(zhǎng)10-15μm,由多達(dá)20,000鞭毛蛋白亞基構(gòu)成。因此,沙門氏菌鞭毛是沙門氏菌感染抗毒力藥物研發(fā)的潛在靶標(biāo),探究并發(fā)現(xiàn)沙門氏菌鞭毛抑制劑對(duì)于沙門氏菌的防控具有重要意義。本發(fā)明首次發(fā)現(xiàn)桉油精可作為沙門氏菌鞭毛抑制劑來(lái)抵抗沙門氏菌的致病力。
桉油精(Cineole),又名桉葉油醇、1,8-環(huán)氧對(duì)孟烷、桉樹(shù)腦等,具有類似樟腦氣味的無(wú)色液體,是來(lái)源于桉樹(shù)屬植物中的一種單萜烯類氧化物,主要存在于桉葉中,在桉葉油中的含量高達(dá)70%,亦存在于豆蔻、迷迭香、艾草等200余種天然植物揮發(fā)油中,是許多芳香植物精油的主要有效成分。
我國(guó)傳統(tǒng)中藥艾葉成分中,桉油精是最重要的藥效學(xué)成分,是艾草發(fā)揮治愈效果的關(guān)鍵成分?,F(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究表明,桉油精具有廣泛的生物活性,包括抑菌、抗炎、抗氧化以及促滲透作用,在醫(yī)藥、化妝品和香料工業(yè)領(lǐng)域廣泛應(yīng)用。近年來(lái)國(guó)內(nèi)外對(duì)桉油精的抑菌、抗炎、鎮(zhèn)痛、抗腫瘤、抗抑郁、神經(jīng)保護(hù)、降血脂、防治糖尿病并發(fā)癥等作用的研究日益深入,顯示其尚有很大的開(kāi)發(fā)潛力。近年來(lái),大量文獻(xiàn)對(duì)桉油精的藥理活性進(jìn)行了報(bào)道。但是,截止到目前國(guó)內(nèi)外尚無(wú)桉油精抑制沙門氏菌鞭毛的相關(guān)研究。
本文提出了桉油精在制備沙門氏菌鞭毛抑制劑中的醫(yī)用用途,為防治沙門氏菌感染提供了新的研究思路和候選天然化合物。
沙門氏菌SL1344生長(zhǎng)曲線
沙門氏菌SL1344接種于2mL LB培養(yǎng)基中過(guò)夜培養(yǎng),次日按照1:100擴(kuò)大培養(yǎng)至100mL LB培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)至OD600nm=0.3時(shí),將菌液等量分裝至5個(gè)錐形瓶?jī)?nèi),每瓶分別加入桉油精使其終濃度分別為32、64、128、256μg/mL,同時(shí)設(shè)DMSO對(duì)照組,37℃,180rpm繼續(xù)培養(yǎng),每隔1h測(cè)定細(xì)菌培養(yǎng)物OD600nm
值并記錄,直至細(xì)菌生長(zhǎng)至平臺(tái)期,繪制生長(zhǎng)曲線。
結(jié)果表明:在有效濃度范圍內(nèi)(32-256μg/mL),桉油精均不影響沙門氏菌SL1344的生長(zhǎng)。
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