探討歐洲花楸懸浮細(xì)胞生長規(guī)律和動力學(xué)參數(shù)。方法：測定歐洲花楸懸浮細(xì)胞生物量及細(xì)胞懸浮液pH值變化；利用細(xì)胞鮮重和干重值對歐洲花楸懸浮細(xì)胞生長曲線進(jìn)行擬合，用數(shù)學(xué)建模模擬歐洲花楸懸浮細(xì)胞增殖情況，并對擬合函數(shù)求一階、二階導(dǎo)數(shù)，求算歐洲花楸懸浮細(xì)胞生長速率及生長加速度。
細(xì)胞生長曲線建模方法
根據(jù)歐洲花楸懸浮細(xì)胞生長曲線，構(gòu)建Logistic、Gompertz和Gauss模型，利用R2值確定最佳擬合模型，并利用matlab2010b軟件，由篩選得到生長曲線函數(shù)中求得細(xì)胞最大增長速度及加速度參數(shù)，
細(xì)胞中次生代謝產(chǎn)物提取和檢測方法
將收獲的細(xì)胞用15 mL甲醇在研缽中研碎，過濾到雞心瓶中，過濾后的細(xì)胞殘?jiān)儆?0 mL甲醇提取一次，合并濾液，置于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上濃縮至干。培養(yǎng)基用15 mL乙酸乙酯萃取兩次，用分液漏斗將乙酸乙酯層轉(zhuǎn)移至雞心瓶中，于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上濃縮至干，后用500μL的甲醇溶解，0.45μm濾膜過濾，用于HPLC檢測。
HPLC測定條件為：4.6×150 mmC18(5μm)reverse column；流動相為水(0.1%甲酸)：甲醇(50∶50)流速0.7 mL·min-1；全波長紫外檢測。
歐洲花楸懸浮細(xì)胞干重增長曲線
結(jié)果：歐洲花楸懸浮細(xì)胞液的pH值隨培養(yǎng)時(shí)間增加而越來越大，培養(yǎng)時(shí)間到16 d，pH>6,不再適宜細(xì)胞生長；Logistic模型能夠描述歐洲花楸懸浮細(xì)胞生長曲線變化。培養(yǎng)第5d時(shí)細(xì)胞增長加速度達(dá)到最大，在8 d時(shí)生長速率達(dá)到最大，結(jié)論：歐洲花楸懸浮細(xì)胞生長函數(shù)符合logistic曲線，函數(shù)為f(x)=0.369 9/(1+10.77e-0.329 2x)，細(xì)胞在14 d時(shí)進(jìn)入增長平臺期，在細(xì)胞生長至第5 d時(shí)可進(jìn)行誘導(dǎo)子處理。
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