1.2方法
1.2.1形態(tài)學(xué)特征觀察
將DH 066和F 107接種于10 g/L CMA，25℃培養(yǎng)。培養(yǎng)過程中，對該菌菌落特征，分生孢子形態(tài)及大小、產(chǎn)孢方式、分生孢子梗大小、捕食結(jié)構(gòu)等進(jìn)行觀察，并按照張克勤等，Zhang K Q等的描述進(jìn)行形態(tài)學(xué)鑒定。
將保存于20 g/L麩皮斜面培養(yǎng)基的DH 066和F 107先接種在4 g/L CMA平皿上，25℃培養(yǎng)7 d后，再接種于10 g/L WBA，10 g/L CMA，20 g/L DIA，20 g/L DA平皿中央，置于25℃培養(yǎng)，3 d后在菌落邊緣以30°～50°角傾斜插入滅菌的蓋玻片，繼續(xù)培養(yǎng)，3 d～6 d后待菌絲完全覆蓋蓋玻片，取出蓋玻片用乳酸酚棉藍(lán)染色液制片，在光學(xué)顯微鏡(OLYMPUS,CX21，日本)下觀察每株菌在不同培養(yǎng)基中分生孢子和分生孢子梗的形態(tài)，并拍照。測量分生孢子的大小(各測50個)。在蓋玻片上畫0.3 cm×0.3 cm的方格，計分生孢子數(shù)，從而推算出每株菌在不同培養(yǎng)基中分生孢子量/cm2，同時計有分枝的分生孢子梗數(shù)及分生孢子?？倲?shù)，計算分生孢子梗的分枝率。
1.2.2對生長在不同培養(yǎng)基中的兩株少孢節(jié)叢孢菌進(jìn)行觀察及測量
將保存于20 g/L麩皮斜面培養(yǎng)基的DH 066和F 107接種于4 g/L CMA平皿上。25℃培養(yǎng)7 d后，用直徑為5 mm的打孔器取出同等大小的帶有菌絲的瓊脂塊，接種于10 g/L WBWA，10 g/L WBA，10 g/L CMWA，10 g/L CMA，20 g/L DIA，20 g/L DA平皿中央，每組3個培養(yǎng)皿。將接種后的培養(yǎng)皿置于25℃下培養(yǎng)，從接種后第3天(即接種后48 h)開始，每天定時觀察并用游標(biāo)卡尺定點(diǎn)測量1次，最后用如下公式計算菌絲生長長度：
菌絲生長長度(mm)=各組中菌絲當(dāng)天的菌落直徑平均值-5
將統(tǒng)計的數(shù)據(jù)用GraphPad Prism 6.0作圖。
2結(jié)果
2.1在不同培養(yǎng)基中DH 066和F 107的形態(tài)
表1捕食線蟲性真菌少孢節(jié)叢孢菌DH 066和F 107在不同培養(yǎng)基中分生孢子的大小
通過對培養(yǎng)于10 g/L CMA的DH 066和F 107進(jìn)行形態(tài)學(xué)觀察，鑒定這2株菌均為少孢節(jié)叢孢菌。培養(yǎng)在不同培養(yǎng)基的DH 066和F 107，其分生孢子大小不同(表1)，DH 066在4種培養(yǎng)基中產(chǎn)生的分生孢子大小依次排列為20 g/L DA>20 g/L DIA>10 g/L WBA≈10 g/L CMA，F(xiàn) 107分生孢子大小依次排列為10 g/L CMA>10 g/L WBA≈20 g/L DIA>20 g/L DA(圖1和圖2)。在4種培養(yǎng)基中的DH 066和F 107的分生孢子均為梨形至倒卵形，1個分隔，偶見2個分隔，具2個分隔的分生孢子約占總體的0.01%(圖1E和圖2E)。分生孢子梗無色，直立，分隔，偶見分枝，分枝率約為0.4%(圖1F和圖2F)，分生孢子梗頂端具瘤節(jié)，分生孢子著生在瘤狀突起的小齒梗上。
A,B,C,D分別是在10 g/L WBA、10 g/L CMA、20 g/L DA、20 g/L DIA培養(yǎng)基中的分生孢子；E.具2個隔的分生孢子；F.分生孢子梗分枝
圖1不同培養(yǎng)基中捕食線蟲性真菌少孢節(jié)叢孢菌DH 066分生孢子形態(tài)及分生孢子梗分枝
A,B,C,D分別是在10 g/L WBA、10 g/L CMA、20 g/L DA、20 g/L DIA培養(yǎng)基中的分生孢子；E.具2個隔的分生孢子；F.分生孢子梗分枝
圖2不同培養(yǎng)基中捕食線蟲性真菌少孢節(jié)叢孢菌F 107分生孢子形態(tài)及分生孢子梗分枝
2.2在不同培養(yǎng)基中DH 066和F 107的分生孢子產(chǎn)量
如圖3所示，DH 066和F 107的分生孢子均在10 g/L WBA培養(yǎng)基中產(chǎn)量最大，在20 g/L DA培養(yǎng)基中產(chǎn)量最低，其中F 107在10 g/L WBA中分生孢子產(chǎn)量和在其他3種培養(yǎng)基的產(chǎn)量有顯著差異(P<0.05)，而DH 066在4種培養(yǎng)基中分生孢子產(chǎn)量差異不顯著(P>0.05)。
圖3捕食線蟲性真菌少孢節(jié)叢孢菌DH 066和F 107在不同培養(yǎng)基中分生孢子量/cm2
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