木材防腐處理可以延長木材的使用壽命,減少木材由于腐朽、蟲蛀引起的降等、降級、廢棄而造成的浪費,對節(jié)省森林資源、降低經(jīng)濟損失和保護自然環(huán)境起著重要的作用。然而,很多傳統(tǒng)的化學木材防腐劑在防止木材被微生物降解的同時,對人類身體健康和自然環(huán)境造成了很大的危害。因此,木材防腐工業(yè)急需低毒、高效、環(huán)境友好型的木材防腐劑,而植物源木材防腐劑的開發(fā)是其中的一條重要途徑。杉木(Cunninghamia lanceolata)為我國南方林區(qū)重要的造林樹種,具有生長快、紋理順直、結構細致、材質輕軟、加工容易、不翹不裂、耐磨性強等優(yōu)點,特別是優(yōu)異的耐腐防蟲性能使杉木得到廣泛應用。樹木提取物是木材具有天然耐腐能力的主要來源。目前對杉木的研究主要集中在精油成分及抑菌活性,并認為柏木腦是賦予杉木耐腐能力的主要物質,而對其它組分的抑菌性能研究較少。
本文以杉木心材木屑為原料,依次經(jīng)正己烷、乙酸乙酯和甲醇浸泡提取,得到3種不同的提取物。前期采用氣相色譜—質譜聯(lián)機方法對這幾種提取物進行了分析,結果表明,正己烷提取物的易揮發(fā)組分中含量最高的3種成分是柏木腦、α-柏木烯和萘類物質,乙酸乙酯提取物易揮發(fā)組分中同樣是這3種成分含量最高。為此,本研究以4種木材腐朽菌為供試菌,對這3種提取物以及柏木腦、α-柏木烯和萘的抑制木腐菌性能進行了分析,以探討杉木心材提取物與其耐腐性能的關系,為研發(fā)相似植物源木材防腐劑奠定理論基礎。
1材料與方法
1.1材料和儀器
人工林杉木心材產(chǎn)自中國福建省。提取所用試劑為正己烷、乙酸乙酯、甲醇,均為分析純,試劑經(jīng)蒸餾后使用。柏木腦和萘為分析純試劑,杉木烯為工業(yè)級,其中α-柏木烯的質量分數(shù)為63.77%(主要雜質為β-柏木烯和羅漢烯)。分析儀器LC2000為上海天美公司生產(chǎn)。
1.2提取
常用提取方法有常溫浸泡法和索氏提取法。索氏提取法雖然提取效率高,但是長時間的加熱會使提取物發(fā)生改變。因此,本文采用常溫浸泡法提取。取20~40目杉木心材木屑依次用正己烷、乙酸乙酯、甲醇經(jīng)過浸泡、過濾、減壓蒸餾,依次獲得黃色、橙紅色和暗紅色的3種提取物,產(chǎn)率分別為0.8%、1.0%和2.8%。
1.3液相色譜分析
采用天美公司LC2000系統(tǒng)和T2000P軟件用于色譜分析,色譜柱為Phenomenex C18柱,流動相為V(甲醇)∶V(乙酸0.067 mol·L-1)=2∶3,流速為0.3 mL·min-1,進樣量10μL,柱溫30℃,檢測波長254 nm。
1.4抑菌性能測定
供試菌包括兩種白腐菌和兩種褐腐菌。白腐菌為彩絨革蓋菌(Trametes versicolor)和乳白耙菌(Irpex lacteus)。褐腐菌為密粘褶菌(Gloeophyllum trabeum)和綿腐臥孔菌(Postia placenta)。
將上述提取物分別用其相應溶劑稀釋至5種不同質量濃度,分別加入到熔融狀態(tài)的無菌PDA培養(yǎng)基中,最終培養(yǎng)基中樣品的質量濃度分別為0.125、0.250、0.500、1.250、2.500 g·L-1。柏木腦、杉木烯和萘由于純度較高,在最終培養(yǎng)基中樣品的質量濃度分別配制為0.050、0.125、0.250、0.500、1.250 g·L-1。
將培養(yǎng)基定量倒入培養(yǎng)皿中,取生長旺盛的相應供試菌菌落放到培養(yǎng)皿中心處,在暗處28℃、相對濕度70%條件下培養(yǎng)。當含有空白樣品的培養(yǎng)基表面布滿菌絲時,以直尺測量含有樣品的培養(yǎng)基表面的菌落直徑,測量精確到1 mm。試驗中發(fā)現(xiàn),甲醇提取物對乳白耙菌的生長有刺激作用,特別是含有2.5 g·L-1甲醇提取物的培養(yǎng)基,其表面乳白耙菌菌絲直徑大于含有其他質量濃度甲醇提取物培養(yǎng)基表面乳白耙菌菌絲的直徑。因此,在對乳白耙菌進行抑菌試驗中,當含有2.5 g·L-1甲醇提取物的培養(yǎng)基表面布滿乳白耙菌菌絲時,測量含有其他質量濃度甲醇提取物培養(yǎng)基表面乳白耙菌菌絲的直徑。樣品抑菌指數(shù)由公式(1)計算得出:
式中:D1為含有樣品的培養(yǎng)基表面菌落直徑;D2為含有空白樣品培養(yǎng)基表面菌落直徑。
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