下面介紹檢驗(yàn)科微生物室細(xì)菌鑒定常見(jiàn)六種菌株的形態(tài)特征、培養(yǎng)鑒別、臨床表現(xiàn)及天然耐藥。
銅綠假單胞菌
銅綠假單胞菌(P.Aeruginosa)原稱綠膿桿菌。在自然界分布廣泛,為土壤中存在的最常見(jiàn)的細(xì)菌之一。各種水、空氣、正常人的皮膚、呼吸道和腸道等都有此菌存在。本菌存在的重要條件是潮濕的環(huán)境。
形態(tài)特征:菌體細(xì)長(zhǎng)且長(zhǎng)短不一,有時(shí)呈球桿狀或線狀,成對(duì)或短鏈狀排列。菌體的一端有單鞭毛,在暗視野顯微鏡或相差顯微鏡下觀察可見(jiàn)細(xì)菌運(yùn)動(dòng)活潑。
培養(yǎng)鑒別:為專性需氧菌,最適生長(zhǎng)溫度為25~30℃,特別是該菌在4℃不生長(zhǎng)而在42℃可以生長(zhǎng)的特點(diǎn)可用以鑒別。在普通培養(yǎng)基上可以生存并能產(chǎn)生水溶性的色素,如綠膿素(pyocynin)與帶熒光的水溶性熒光素(pyoverdin)等。在血平板上會(huì)有透明溶血環(huán)。
臨床表現(xiàn):為條件致病菌,是醫(yī)院內(nèi)感染的主要病原菌之一。患代謝性疾病、血液病和惡性腫瘤的患者,以及術(shù)后或某些治療后的患者易感染本菌。
常引起術(shù)后傷口感染,也可引起褥瘡、膿腫、化膿性中耳炎等。本菌引起的感染病灶可導(dǎo)致菌血癥和敗血癥。燒傷后感染了銅綠色假單胞菌可造成死亡。
天然耐藥:氨芐西林、阿莫西林、阿莫西林/克拉維酸、第1代頭孢菌素、第2代頭孢菌素、頭孢噻肟,頭孢曲松,萘啶酸,甲氧嘧啶
鮑曼不動(dòng)桿菌
鮑曼不動(dòng)桿菌屬于非發(fā)酵革蘭陰性桿菌中假單胞菌目莫拉菌科的不動(dòng)桿菌屬,本菌革蘭染色陰性,不發(fā)酵糖類(麥康凱上為無(wú)色菌落),氧化酶陰性。
形態(tài)特征:有莢膜、菌毛,無(wú)芽孢和鞭毛。鏡下菌體多為球桿狀,常成雙排列,看似雙球菌(常被誤認(rèn)為奈瑟屬細(xì)菌),有時(shí)不易脫色(常誤認(rèn)成陽(yáng)性球菌,但一般菌體著色不均,可用于鑒別)。
培養(yǎng)鑒別:鮑曼不動(dòng)桿菌有較強(qiáng)的粘附力,易于附著于物體表面。最適生長(zhǎng)溫度為35度,有些菌株可在42度生長(zhǎng)。抵抗力強(qiáng),在干燥的物體表面可存活25天,遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過(guò)其他革蘭陰性桿菌。
臨床表現(xiàn):鮑曼不動(dòng)桿菌在醫(yī)院環(huán)境中分布廣泛且在環(huán)境中可以長(zhǎng)期存活,易在住院患者皮膚、結(jié)膜、口腔、呼吸道、胃腸道及泌尿生殖道等部位定植,極易造成危重患者的感染。
該菌主要引起呼吸道感染,也可引發(fā)菌血癥、泌尿系統(tǒng)感染、繼發(fā)性腦膜炎、手術(shù)部位感染以及呼吸機(jī)相關(guān)性肺炎等。
天然耐藥:氨芐西林、阿莫西林、第1代頭孢菌素
肺炎鏈球菌
肺炎鏈球菌為革蘭染色陽(yáng)性,菌體似矛頭狀,成雙或成短鏈狀排列的雙球菌,有毒株菌體外有化學(xué)成分為多糖的莢膜。5%~10%正常人上呼吸道中攜帶此菌。有毒株是引起人類疾病的重要病原菌。
形態(tài)特征:肺炎鏈球菌革蘭染色呈陽(yáng)性,直徑約1μm。常呈雙排列。菌體成矛頭狀,寬端相對(duì),尖端向外。在痰、膿液標(biāo)本中可呈單個(gè)或短鏈狀。有毒株在體內(nèi)形成莢膜。普通染色時(shí)莢膜不著色,表現(xiàn)為菌體周圍透明環(huán)。無(wú)鞭毛,不形成芽胞。
培養(yǎng)鑒別:本菌營(yíng)養(yǎng)要求較高,需在含血液或血清的培養(yǎng)基中生長(zhǎng)。在固體培養(yǎng)基上形成小圓形、隆起、表面光滑、濕潤(rùn)的菌落。培養(yǎng)初期菌落隆起呈穹窿形,隨著培養(yǎng)時(shí)間延長(zhǎng),細(xì)菌產(chǎn)生的自溶酶裂解細(xì)菌,使菌落中央凹陷,邊緣隆起成"臍狀"。表面活性劑如膽汁或脫氧膽酸鹽可激活自溶酶,加速菌體自溶。
兼性厭氧,C02 5-10%生長(zhǎng)最好,且生成的菌落周圍有草綠色溶血環(huán)。若于液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)24h,呈均勻混濁,后期可因產(chǎn)生自溶而變得澄清。
臨床表現(xiàn):肺炎鏈球主要引起人類大葉性肺炎。75%的成年人肺炎鏈球菌肺炎及50%以上嚴(yán)重的肺炎鏈球菌菌血癥是由1~8型肺炎鏈球菌引起。肺炎鏈球菌6、14、19及23型,常引起兒童肺炎鏈球菌性疾病。40%~70%的正常人上呼吸道中攜帶有毒力的肺炎鏈球菌。
當(dāng)出現(xiàn)某種降低這種抵抗功能的因素時(shí),肺炎鏈球菌可引起感染,如呼吸道功能異常、循環(huán)系統(tǒng)功能異常及任何原因?qū)е碌姆纬溲?、心功能衰竭等?
天然耐藥:甲氧嘧啶、氨基糖苷類抗生素
大腸埃希菌
大腸埃希菌屬于腸桿菌目腸桿菌科埃希菌屬,是埃希菌屬的代表菌種,常習(xí)慣稱為大腸桿菌,是人和動(dòng)物腸道的正常寄生菌,也是構(gòu)成腸道正常菌群的主要部分。
形態(tài)特征:為革蘭陰性桿菌,兩端鈍圓粗短,大小為1.1~1.5μm×2~6μm,多數(shù)有周鞭毛。
麥康凱平板上,中心粗糙型,似”花蕊”狀結(jié)構(gòu)。后經(jīng)鑒定為大腸埃希菌
培養(yǎng)鑒別:兼性厭氧,對(duì)營(yíng)養(yǎng)要求不高。在麥康凱平板上形成紅色、圓形隆起的菌落;在血瓊脂平板上通常形成圓形、稍凸、邊緣整齊、灰白色、不透明的光滑、濕潤(rùn)菌落,少數(shù)菌株產(chǎn)生β-溶血環(huán),少數(shù)呈黏液型菌落或較大、扁平、皺起的粗糙型菌落。
臨床表現(xiàn):在某些條件下,大腸埃希菌可以成為條件致病菌,比如有異物的存在(如導(dǎo)尿管)、宿主損傷或正常無(wú)菌部位的破損引起了糞便或高濃度混合菌的侵入。根據(jù)病原性大腸埃希菌是否在腸道內(nèi),將其大致分為兩類:腸外致病性大腸埃希菌和腸內(nèi)(或致瀉性)大腸埃希菌。
腸外致病性大腸埃希菌存在多種毒力基因,產(chǎn)生黏附素、保護(hù)素、毒素等毒力因子,引起腸道外疾病。主要引起尿路感染,還可引起膽囊炎、新生兒腦膜炎、醫(yī)院獲得性肺炎、菌血癥、膿毒癥等,常見(jiàn)于腹腔內(nèi)膿腫、腸穿孔繼發(fā)腹膜炎、腸道手術(shù)后繼發(fā)感染或大面積灼傷創(chuàng)面感染。
天然耐藥:克林霉素、達(dá)托霉素、夫西地酸、利奈唑胺、利福平、大環(huán)內(nèi)酯類、糖肽類和脂肽類抗菌藥物
金黃色葡萄球菌
金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)是人類的一種重要病原菌,隸屬于葡萄球菌屬(Staphylococcus),有"嗜肉菌"的別稱,是革蘭氏陽(yáng)性菌的代表,可引起許多嚴(yán)重感染。
形態(tài)特征:典型的金黃色葡萄球菌為球形,直徑0.8μm左右,顯微鏡下排列成葡萄串狀。革蘭陽(yáng)性菌,無(wú)芽孢、無(wú)鞭毛,體外培養(yǎng)時(shí)一般不形成莢膜,但少數(shù)菌株的細(xì)胞壁外層可見(jiàn)有莢膜樣粘液物質(zhì)。在某些化學(xué)物質(zhì)(青霉素)作用下,可裂解或變成L型。
培養(yǎng)鑒別:金黃色葡萄球菌營(yíng)養(yǎng)要求不高,在普通培養(yǎng)基上生長(zhǎng)良好,需氧或兼性厭氧,最適生長(zhǎng)溫度37℃,最適生長(zhǎng)pH7.4。平板上菌落厚、有光澤、圓形凸起,直徑1-2mm。血平板菌落周圍形成透明的溶血環(huán)。
金黃色葡萄球菌有高度的耐鹽性,可在10%-15%NaCl肉湯中生長(zhǎng)??煞纸馄咸烟?、麥芽糖、乳糖、蔗糖,產(chǎn)酸不產(chǎn)氣。
甲基紅反應(yīng)陽(yáng)性,VP反應(yīng)弱陽(yáng)性。許多菌株可分解精氨酸,水解尿素,還原硝酸鹽,液化明膠。在干燥環(huán)境中存活數(shù)月;空氣中存在,但不繁殖。
耐熱性強(qiáng),加熱70℃1h,80℃30min不被殺死;耐低溫,在冷凍食品中不易死亡;耐高滲,在含有50%-66%蔗糖或15%以上食鹽食品中才可被抑制,能在15%NaCl和40%膽汁中生長(zhǎng)。金黃色葡萄球菌具有較強(qiáng)的抵抗力,對(duì)磺胺類藥物敏感性低,但對(duì)青霉素、紅霉素等高度敏感。
臨床表現(xiàn):金黃色葡萄球菌是人類化膿感染中最常見(jiàn)的病原菌,可引起局部化膿感染,也可引起肺炎、偽膜性腸炎、心包炎等,甚至敗血癥、膿毒癥等全身感染。其致病力強(qiáng)弱主要取決于其產(chǎn)生的毒素和侵襲性酶:
天然耐藥:氨曲南、多粘菌素E、萘啶酸
流感嗜血桿菌
流感嗜血桿菌是一種沒(méi)有運(yùn)動(dòng)力的革蘭氏陰性桿菌,于1892年由費(fèi)佛博士在流行性感冒的瘟疫中發(fā)現(xiàn),最初被誤認(rèn)為是流行性感冒的病因。
形態(tài)特征:G-短小桿菌,大小為(0.3-0.4)×1.5μm,兩端鈍圓,無(wú)鞭毛,無(wú)芽孢,粘液型菌落有莢膜。
培養(yǎng)鑒別:需氧,在5%-10%的二氧化碳環(huán)境下可促進(jìn)生長(zhǎng),生成需要Ⅹ、V兩種因子,最適宜的培養(yǎng)基是巧克力瓊脂平板。
在巧克力瓊脂平板上35℃培養(yǎng)18-24h形成微小、無(wú)色透明、似露滴狀的菌落,且有鼠臭味;培養(yǎng)48h菌落直徑可達(dá)1.5mm,培養(yǎng)72h后,菌落直徑可達(dá)3-4mm,在血瓊脂平板上金黃色葡萄糖周圍形成極小、圓形、透明的菌落,并有“衛(wèi)星現(xiàn)象”,有些菌株可產(chǎn)生黏液型菌落。
臨床表現(xiàn):流感嗜血桿菌是細(xì)菌性肺炎較為常見(jiàn)的病原之一,高發(fā)于低齡兒童及春冬交替之際。
流感嗜血桿菌感染會(huì)引起寄生部位發(fā)生炎癥,導(dǎo)致肺炎、化膿性腦膜炎、中炎、鼻竇炎、菌血癥等疾病。不同疾病嚴(yán)重程度不一,其中,腦膜炎是流感嗜血桿菌感染導(dǎo)致的最嚴(yán)重疾病,病死率較高且容易導(dǎo)致嚴(yán)重的后遺癥。
天然耐藥:青霉素、紅霉素、克林霉素
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