制作活動全口義齒和局部義齒最常用的材料是聚甲基丙烯酸甲酯(PMMA)。由于其良好的美觀效果、可承受的生產(chǎn)成本和制造簡單性，這種材料得到了廣泛的應用。當患者忽視保持假牙清潔時，該區(qū)域通常會檢測到包括白色念珠菌和變形鏈球菌在內(nèi)的微生物。假牙口炎（DS）是一種真菌感染，在假牙使用者中發(fā)病率很高，是最常見的真菌感染之一。盡管DS可能涉及全身因素，但義齒表面上形成的微生物菌斑的鑒定是導致DS發(fā)生的關鍵因素。Citation6白色念珠菌與DS的發(fā)生以及其他因素（包括創(chuàng)傷、全身性疾病、假牙衛(wèi)生不良）有關。某些報告稱，變形鏈球菌會促進白色念珠菌在假體上生長，從而導致DS。因此預防DS的關鍵措施包括限制義齒菌斑內(nèi)微生物的增殖,必須仔細清潔假牙，以降低交叉污染的風險并促進最佳的口腔健康。對于機械清潔方式有困難的患者，建議使用化學義齒清潔劑來清潔義齒。人們普遍認為變形鏈球菌是導致齲齒的一個重要因素，進入循環(huán)系統(tǒng)后可能會導致亞急性細菌性心內(nèi)膜炎等全身性疾病，但AgBr-NP CTMAB的抗菌活性對變形鏈球菌生長的具體影響仍然存在,變異病毒仍然未知。需要進一步研究來闡明AgBr-NP CTMAB在促進口腔健康方面的功能。本研究的目的是確定AgBr-NP CTMAB在抑制變形鏈球菌生長和防止生物膜形成方面的功效，其次評估AgBr-NP CTMAB對表面硬度的影響PMMA與蒸餾水和Polident相比的、彎曲強度和粗糙度。
Bioscreen全自動生長曲線分析儀的應用
將200μL 1×106 CFU/mL的細菌加入到自動生長曲線分析儀的平板中，設3個平行孔。使用Bioscreen全自動生長曲線分析儀監(jiān)測變形鏈球菌在37°C和持續(xù)中速搖動下24小時培養(yǎng)期內(nèi)的動態(tài)發(fā)育。每隔1小時測定OD600nm值，以變形鏈球菌的OD值為縱坐標，以培養(yǎng)時間為橫坐標，繪制生長曲線。這種系統(tǒng)方法確保了在特定實驗條件下精確跟蹤和記錄變形鏈球菌的生長動態(tài)。根據(jù)CLSI（臨床和實驗室標準研究所）標準化標準，將測試濃度的AgBr-NP CTMAB溶液施用到含有106 CFU/mL變形鏈球菌的平板上。這些濃度為10μg/mL、5μg/mL、2.5μg/mL、1.25μg/mL和0.625μg/mL。將溶液在37°C有氧條件下孵育24小時。每組一式三份。實驗重復三次。使用Bioscreen自動生長曲線分析儀捕獲變形鏈球菌的動態(tài)生長以及生長曲線。
實驗結果
AgBr-NP CTMAB溶液對浮游變形鏈球菌表現(xiàn)出強大的抗菌作用，最低殺菌濃度為5μg/mL。10μg/mL AgBr-NP CTMAB溶液可有效抑制變形鏈球菌生物膜的形成。(2)AgBr-NP CTMAB(10μg/mL和20μg/mL)浸泡后表面粗糙度與蒸餾水相比無顯著性差異(P>0.05)，Polident顯著高于蒸餾水(P<0.05)。與蒸餾水中相比，浸泡在Polident中的PMMA樣品的表面硬度顯著降低（P<0.05）。而浸泡在AgBr-NP CTMAB中后表面硬度沒有顯著差異（P>0.05）。彎曲強度結果表明AgBr-NP CTMAB與Polident和水之間沒有統(tǒng)計學差異。AgBrNP CTMAB可以有效抑制浮游生物形鏈球菌的生長和生物膜的形成，而不影響PMMA的彎曲強度、顯微硬度或表面粗糙度。因此，AgBrNP CTMAB有望成為一種新型假牙清潔劑。
圖1、不同濃度AgBr-NP CTMAB對變形鏈球菌的生長曲線。
圖2、AgBr-NP CTMAB對變形鏈球菌的抑制區(qū)域照片。在圖中，在陰性對照PBS組周圍沒有觀察到明顯的抑制圈，表明沒有顯著的抑制作用。然而，在用AgBr-NP CTMAB溶液處理的濾紙周圍觀察到明顯的抑制圈。500μg/mL AgBr-NP CTMAB濾紙可以達到與0.05%氯氰菊酯相似的抑制圈。
圖3、各組溶液孵育24 h后600 nm處的OD結果。在圖中OD600 nm值與NC組差異顯著，而2.5μg/mL、1.25μg/mL和0.625μg/mL AgBr-NP CTMAB溶液的OD600 nm值與陰性對照組無統(tǒng)計學差異。
圖4、孵育24 h后各組溶液的濁度。將各組溶液轉移至離心管中并拍照，10μg/mL、5μg/mL AgBr-NP CTMAB溶液和CPC溶液組與NC組相比，濁度明顯降低。2.5μg/mL、1.25μg/mL、0.625μg/mL AgBr-NP CTMAB溶液與陰性對照組的濁度無顯著差異。
圖5、不同溶液組中BHI瓊脂平板培養(yǎng)48小時后的菌落生長情況。(A)原始溶液涂覆板的結果。(B)稀釋10,0000倍后涂板的結果。與NC組相比，5μg/mL、10μg/mL AgBr-NP CTMAB和0.1%氯化十六烷基吡啶溶液組均未見菌落。相比之下，2.5μg/mL、1.25μg/mL和0.625μg/mL的AgBr-NP CTMAB溶液組顯示菌落遍布整個平板，且菌落生長與NC組相似。5μg/mL、10μg/mL AgBr-NP CTMAB溶液和0.1%氯化十六烷基吡啶溶液組均未發(fā)現(xiàn)菌落生長。相比之下，2.5μg/mL、1.25μg/mL、0.625μg/mL的AgBr-NP CTMAB溶液組，隨著濃度的降低，菌落數(shù)量由稀疏變得密集，表明AgBr-NP CTMAB溶液組的抑菌能力增強。
總結
本論文研究AgBr納米顆粒（NP） CTMAB（十六烷基三甲基溴化銨）對變形鏈球菌（S.mutans）及其生物膜的抑制作用，并評估聚甲基丙烯酸甲酯（PMMA）表面粗糙度（Ra）、顯微硬度、和長時間浸泡在AgBr-NP CTMAB中的彎曲強度，適用于義齒清潔行業(yè)。研究人員通過菌落形成試驗、OD600和激光共聚焦顯微鏡測量AgBr-NP CTMAB對變形鏈球菌的抗菌活性。在浸泡溶液180或360天后測量樣品表面粗糙度、顯微硬度和彎曲強度(MPa)值的變化。AgBrNP CTMAB可以有效抑制浮游生物S.mutans的生長和生物膜的形成，而不影響PMMA的彎曲強度、顯微硬度或表面粗糙度。因此研究人員認為AgBrNP CTMAB有望成為一種新型假牙清潔劑。
相關新聞推薦
3、2'-巖藻糖基乳糖作為益生元對兩歧雙歧桿菌的益生菌的影響（下）